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聲鑷譜儀
聲鑷譜儀

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AFS,,了解單分子層面復(fù)雜的生物過程是預(yù)防和治療癌癥及其他疾病的關(guān)鍵,,聲學(xué)力譜儀作為即時(shí)可用的單分子檢測(cè)儀器,實(shí)現(xiàn)了活體測(cè)量技術(shù)的突破以及分子水平上相互作用的成像,。

原理:

AFS技術(shù)由玻璃微流控芯片和透明的壓電變換器構(gòu)成來產(chǎn)生共振聲波,。AFS芯片上的聲波(超聲波)可同時(shí)并行地在數(shù)千個(gè)生物分子(如DNA,RNA或蛋白質(zhì))施加亞皮牛頓(pn)到數(shù)百皮牛頓(pn)的力,,同時(shí)具有亞毫秒的響應(yīng)時(shí)間及固有穩(wěn)定性,。

AFS作為一個(gè)理想的工具在核酸蛋白、藥物蛋白和抗原抗體層面上破譯分子間相互作用的詳情,。AFS技術(shù)能夠使科學(xué)家研究蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能相互關(guān)系,,新的生物機(jī)制和細(xì)胞力學(xué),也可用于研究和識(shí)別自由能圖,,動(dòng)力學(xué)速率和在反應(yīng)過程中的中間態(tài),。

AFS作為一個(gè)高度集成化的系統(tǒng),包括倒置光學(xué)顯微鏡與軟件,、工作站及相關(guān)電子器件,,用戶界面友好,操控方便,。

技術(shù)特點(diǎn):

* 微流控芯片實(shí)驗(yàn)室技術(shù)(Lab-on-Chip)

* 單分子操縱

* 高度并行

* 亞毫秒響應(yīng)時(shí)間

* 固有穩(wěn)定性

* 安全和友好的用戶界面

* 高性價(jià)比

產(chǎn)品應(yīng)用:動(dòng)態(tài)力譜,、恒力測(cè)試、力-距離曲線,、生物聚合物力學(xué)、鍵斷裂,、微流變學(xué),、細(xì)胞力學(xué)、水凝膠力學(xué)性能

我們的用

* 俄羅斯圣彼得堡大學(xué)

* 新加坡國(guó)立大學(xué)

* CSIC馬德里

* 那不勒斯菲里德里克第二大學(xué)

* 中國(guó)科學(xué)院物理研究所

* 九州大學(xué)

* 科羅拉多州立大學(xué)

* 德國(guó)慕尼黑大學(xué)

* 巴斯德研究所

文獻(xiàn):nature communications 2012,, molecular cells 2013基于AFS技術(shù)的細(xì)胞操縱

AFS技術(shù)為科學(xué)家提供了來操縱任一物質(zhì)的****能力,,與懸浮的液體介質(zhì)相比,密度不同,。通過這個(gè)方法,,力不僅可以作用于合成微球,也能作用于

活體物質(zhì)本身。

我們用AFS模塊施加力于神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,,并在商售的徠卡共焦顯微鏡(徠卡TCS SP8)下觀察,。成像平面與聲學(xué)節(jié)點(diǎn)放置位置一致,大概在AFS芯片底

部表面以上40微米左右,。一旦啟用聲場(chǎng),,熒光標(biāo)記的細(xì)胞被迅速推離表面進(jìn)入到聲學(xué)節(jié)點(diǎn),并且呈現(xiàn)在成像平面,。當(dāng)聲力停止時(shí),,細(xì)胞由于重力原因下降,逐

漸從熒光圖像中消失,。

通過直接作用力于細(xì)胞這一能力,,針對(duì)細(xì)胞生物學(xué)研究,AFS有非常大潛力,,例如細(xì)胞粘附,,細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和細(xì)胞分化等研究。

高精度力學(xué)及長(zhǎng)度測(cè)量

AFS是對(duì)單個(gè)生物分子進(jìn)行高精度力學(xué)測(cè)量的理想工具,。我們?cè)诖送ㄟ^對(duì)單個(gè)DNA分子不同張力程度及使用AFS的跟蹤軟件測(cè)量其長(zhǎng)度來證明AFS的高測(cè)量

精度,。

本實(shí)驗(yàn)是在被拴在鏈霉親和素包裹的聚苯乙烯微球(直徑4.5μm)上的單個(gè)DNA分子(長(zhǎng)度8.4 kbps)上進(jìn)行的。用測(cè)量之前已生成的對(duì)照表來跟蹤微球的

高度可達(dá)納米精度,。測(cè)量過程中,,我們將驅(qū)動(dòng)電壓的(正負(fù)峰間)幅度從0 Vpp增加到2.1 Vpp,相應(yīng)的聲學(xué)力從0 pN增加到15.8 pN,。AFS軟件能實(shí)時(shí)確定在

各種力作用下的DNA長(zhǎng)度,,以此來探測(cè)生物活動(dòng),如蛋白質(zhì)-DNA的相互作用,。具有14位垂直分辨率的信號(hào)發(fā)生器產(chǎn)生的亞皮牛頓(pN)精度的恒聲學(xué)力具有數(shù)

小時(shí)的穩(wěn)定性和亞毫秒的響應(yīng)時(shí)間,。

高數(shù)據(jù)量的鍵斷裂測(cè)量

統(tǒng)計(jì)分析和高數(shù)據(jù)量采集對(duì)于抗體-抗原相互作用的表征是至關(guān)重要的。由于AFS多數(shù)量分子測(cè)試的能力,,大量的鍵可以并行測(cè)試,,大大減少了測(cè)量時(shí)間。

這個(gè)實(shí)驗(yàn)展示了AFS能夠在單個(gè)測(cè)量實(shí)驗(yàn)中獲取一個(gè)完整的251個(gè)單分子Dig:: anti-Dig鍵斷裂力分布,。

251個(gè)Dig::anti-Dig鍵,,拉伸載荷率為2.3 pN/s,每Dig::anti-Dig鍵的斷裂力記錄下來并繪制成一個(gè)斷裂力柱狀圖,。此柱狀圖在相同條件下的單個(gè)實(shí)驗(yàn)中得到,,保證實(shí)驗(yàn)的可靠性和重現(xiàn)性。AFS能夠應(yīng)用加載速率跨越幾個(gè)數(shù)量級(jí)(10-4 PN / s到103 PN / s),,使之成為高度并行測(cè)量動(dòng)態(tài)力學(xué)譜的理想工具,。

測(cè)量RNA聚合酶的活動(dòng)機(jī)制

AFS其自身功能多樣化和力穩(wěn)定性的設(shè)計(jì)使其成為研究DNA分子的活動(dòng)規(guī)律和機(jī)制的理想工具,,涵蓋亞秒到小時(shí)的時(shí)間量程。RNA聚合酶的活動(dòng)通常具有復(fù)雜性:其正常工作機(jī)制往往被不同性質(zhì)的事件中斷,。

在這個(gè)實(shí)驗(yàn)中,,DNA分子和被處理過的大腸桿菌聚合酶復(fù)合被固定在AFS芯片表面。聚苯乙烯微球表面粘附能夠使DNA分子延伸的大腸桿菌RNA聚合酶,。一旦開始轉(zhuǎn)錄和復(fù)制,,通過實(shí)時(shí)測(cè)量DNA的延伸,能夠精確檢測(cè)每個(gè)大腸桿菌聚合酶分子的活動(dòng),,多個(gè)大腸桿菌RNA聚合酶的活動(dòng)機(jī)制在該試驗(yàn)中可以同時(shí)并行測(cè)量,。如實(shí)驗(yàn)所示,RNA聚合酶延伸動(dòng)力學(xué)由于其運(yùn)動(dòng)機(jī)制常被出現(xiàn)的事件影響而體現(xiàn)出高度的隨機(jī)性,,AFS作為一個(gè)有效的研究手段非常適合解決該問題,。

AFS規(guī)格參數(shù)

AFS是一個(gè)真正的測(cè)量單分子的工具,包括一個(gè)專用的倒置光學(xué)顯微鏡,,射流模塊和電子組件,,集成在一個(gè)小箱體內(nèi) (300mm×375mm×200mm)。

AFS專用顯微鏡

單色LED照明 波長(zhǎng)660 nm

CFI消色差物鏡(可升級(jí))尼康40x,、NA 0.65,,WD 0.65mm 校正色差,球面像差,,模糊和圖像的平坦性

電動(dòng)Z軸物鏡臺(tái)(可升級(jí))高性能兩相步進(jìn)微平移臺(tái),,行程范圍5 mm,步長(zhǎng)50 nm,,亞納米級(jí)的穩(wěn)定性

USB 3.0 CMOS攝像頭(可升級(jí))1280×1024像素(像素大小5.3 μm),,1.31兆像素 全視場(chǎng)實(shí)時(shí)并行測(cè)量高達(dá)60赫茲

手動(dòng)XY樣品臺(tái)

微米精度20毫米行程范圍雙燕尾導(dǎo)軌,,使用戶能測(cè)量樣品內(nèi)不同的位置,,配帶有刻度按鈕的細(xì)牙螺紋軸

信號(hào)發(fā)生器(可升級(jí))

能承受共振聲波達(dá)10Vpp(電壓峰峰值,在50Ω阻抗下)可以實(shí)現(xiàn)10-5 赫茲到千赫茲甚至千赫茲以上頻率范圍的不同時(shí)間尺度的動(dòng)態(tài)力學(xué)譜和力的掃描

超越的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性,,在14位垂直分辨率下的靜態(tài)和動(dòng)態(tài)力測(cè)量

AFS芯片

AFS系統(tǒng)包含三種AFS芯片,,每個(gè)AFS芯片都會(huì)提前校準(zhǔn)并且給出芯片的共振頻率

加載速率范圍:10-4 PN / s103 PN / s

AFS芯片尺寸:45 mm x 15 mm x 1.275 mm

**加載力:大于200 pN(4.5μm的聚苯乙烯微球,采用電壓放大器)

全新的AFS芯片設(shè)計(jì),,我們將不斷地改進(jìn)AFS芯片,。與AFS用戶密切合作,提高芯片的性能,、功能和可用性。

AFS工作站及軟件(可升級(jí))

AFS包括labview軟件包和一個(gè)強(qiáng)大的工作站,。AFS軟件能夠?qū)崟r(shí)以納米級(jí)分辨率并行測(cè)試數(shù)以千計(jì)的微球,。

主要特點(diǎn):

在25赫茲實(shí)時(shí)并行三維跟蹤60-300個(gè)微球

在25赫茲實(shí)時(shí)并行二維跟蹤300-1500個(gè)微球

在25赫茲實(shí)時(shí)跟蹤(X,,Y)位置精度為2納米

在25赫茲實(shí)時(shí)跟蹤(Z)位置精度為5納米

通過參照微球的差值跟蹤進(jìn)行(Z)方向漂移較正

自動(dòng)對(duì)照表校準(zhǔn)

AFS放大器(可選)

AFS的功能可通過一個(gè)電壓放大器擴(kuò)展。電壓增加,,應(yīng)用與生物分子的**加載力相應(yīng)增加,。

放大器可以很容易通過后面板連接到AFS。AFS計(jì)算機(jī)已經(jīng)預(yù)裝所有相關(guān)的軟件和驅(qū)動(dòng)程序以適用于電壓放大器,。

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