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熱釋光測(cè)量?jī)x是研究光合作用的強(qiáng)有力的工具,,是研究PSII電子傳輸?shù)挠行结?,廣泛應(yīng)用于除草劑對(duì)PSII的受體效應(yīng)、QA與QB穩(wěn)定性,、光合放氧復(fù)合物(OEC)穩(wěn)定性及PSII總體完整性等,,還用于光合突變個(gè)體的篩選等。
TL200系列熱釋光測(cè)量?jī)x是針對(duì)研究PSII能量水平結(jié)構(gòu)而設(shè)計(jì)的,。PSII反應(yīng)中心光誘導(dǎo)電荷分離導(dǎo)致儲(chǔ)存了吸收光能的激發(fā)電子對(duì)的累積,。加熱誘導(dǎo)這些激發(fā)電子對(duì)的重組,從而引發(fā)光釋放,,并在一定溫度范圍內(nèi)形成特異性熱釋光曲線,。根據(jù)不同釋光曲線的形狀、峰位和峰值,,可以研究分析關(guān)于特定激發(fā)電子對(duì)的能量穩(wěn)定性及PSII反應(yīng)中心功能等,。TL200系列熱釋光測(cè)量?jī)x的測(cè)量范圍為-90°C到+190°C,使用范圍更寬,,可以對(duì)低溫,、高溫段熱釋光進(jìn)行研究。
應(yīng)用領(lǐng)域
1,、 光合機(jī)理研究——捕光色素復(fù)合體,,PSII反應(yīng)中心,放氧復(fù)合物研究,;PSII能級(jí)分析,;原初反應(yīng)階段的內(nèi)在過程探測(cè)
2、 植物脅迫生理的早期檢測(cè)與診斷
3,、 植物病蟲害相關(guān)研究
4,、 除草劑影響
5、 對(duì)植物光合研究的完善補(bǔ)充
典型樣品
植物碎片
各種微藻
葉綠體懸浮液
類囊體懸浮液
工作原理
熱釋光(Thermoluminescence,,縮寫TL)是晶體受到輻射照射后,,會(huì)產(chǎn)生自由電子,這些電子被晶格缺陷俘獲而積攢起來,,在加熱過程中以光形式釋放出來,。其基本的實(shí)驗(yàn)過程是將葉片快速冷凍到某一溫度,,之后給葉片一個(gè)足夠強(qiáng),但時(shí)間盡量短(一般<5µs)的單翻轉(zhuǎn)光(single turn-over flash),,用于誘導(dǎo)每個(gè)PSII反映中心發(fā)生僅一次的電荷分離,;然后逐漸升溫,同時(shí)測(cè)量葉片放出的熱釋光,,繪制TL譜帶,。
熱釋光研究中的一個(gè)主要工具是單次翻轉(zhuǎn)光閃,要求足夠強(qiáng)(光源強(qiáng)度高達(dá) 150 000 µmol(photons).m-2.s-1)和足夠短(典型 < 5 微秒)來誘導(dǎo)每一個(gè)PSII反應(yīng)中心發(fā)生一次,,且僅一次的電荷分離,。光閃的飽和效果可以通過QB段的強(qiáng)度來檢查,它應(yīng)該在**光閃后達(dá)到**,,在2次光閃后不再增加,。當(dāng)前許多實(shí)驗(yàn)中使用的氙燈光閃具有明顯缺陷——一個(gè)長(zhǎng)的持續(xù)發(fā)光,或者“閃光拖尾”,,這會(huì)在某些PSII反應(yīng)中心中產(chǎn)生兩次的電荷分離(連擊),。雖然激光閃光能夠有效降低連擊,但不能消除,。
TL200系列熱釋光測(cè)量?jī)x使用能量足夠強(qiáng)的LED光源,,所釋放5-10µs的方波脈沖能夠飽和所有的PSII反應(yīng)中心,其溫度控制單元可以在降溫后,,再使樣品的溫度以0.1℃/sec到 2℃/sec的速率線性增加,。不同的閃光序列及樣品處理能夠使樣品處于不同的能量狀態(tài),不同的溫度下釋放的光能源自光合機(jī)構(gòu)的不同結(jié)構(gòu),。分析釋光曲線的形狀,、峰位和峰值,可以研究分析關(guān)于特定激發(fā)電子對(duì)的能量穩(wěn)定性及PSII反應(yīng)中心功能等,。
TL200系列熱釋光測(cè)量?jī)x三種型號(hào)的控溫方式與范圍
具體型號(hào) | 控溫方式 | 控溫范圍 |
TL200/PMT標(biāo)準(zhǔn)版 | 水冷單元——控溫模塊 | -25 ℃ 到+70 ℃ |
TL300/HT高溫版 | 水冷單元——高溫控制模塊 | -25 ℃ 到+190 ℃ |
TL400/LT液氮版 | 水冷單元——液氮制冷單元——控溫模塊 | -90 ℃ 到+70 ℃ |
系統(tǒng)組成
TL200系列熱釋光測(cè)量系統(tǒng)由3部分組成:多功能控制單元,、溫度調(diào)節(jié)器控制單元及測(cè)量室。
多功能控制單元(Multipurpose Control Unit)根據(jù)用戶定義方案或熱發(fā)光向?qū)峁┑膶?shí)驗(yàn)程序來執(zhí)行實(shí)驗(yàn)過程,,有兩個(gè)輸入頻道,,一個(gè)用于測(cè)量熱發(fā)光信號(hào)(TL信號(hào)),另一個(gè)用于測(cè)量溫度,。 測(cè)量曲線以兩種格式顯示:時(shí)間/溫度和時(shí)間/TL信號(hào),,或溫度/TL信號(hào)。
溫度調(diào)節(jié)器控制單元(Thermoregulator Control Unit)可以在-90°C 到 +190°C范圍內(nèi)以0.1°C的精確度控制樣品的溫度,。 系統(tǒng)前面板可以顯示實(shí)際的溫度,,溫度調(diào)節(jié)可以通過手動(dòng)或程序控制(軟件)來實(shí)現(xiàn)。有兩種工作模式:恒溫模式和溫度梯度模式,在恒溫模式下儀器將維持樣品在恒定的溫度,,而在溫度梯度模式下,,可以使樣品的溫度以0.1°C/sec到 2°C/sec的速率線性變化。
AC-88水冷單元可將系統(tǒng)溫度降低到4°C,,包含一個(gè)電子控制的抽水泵和內(nèi)部可以儲(chǔ)水的制冷器,用于降低測(cè)量室的環(huán)境溫度,。
CryoFab液氮罐通過管路連接到測(cè)量室,,通過電子控制的低溫輸出閥可以將系統(tǒng)溫度控制在 -20°C 到 -90°C。
由TFPE單元控制的輔助加熱模塊可以將系統(tǒng)溫度加熱到+190°C,。
測(cè)量室(Measuring Chamber)又包括四個(gè)關(guān)鍵組成部分:光源,、 光電倍增器、A/D 轉(zhuǎn)換器,、具有溫度控制器的樣品盤:
1. 光源由8個(gè)超亮的發(fā)光二極管(λmax=630 nm)組成,,發(fā)射的光閃強(qiáng)度高達(dá)150,000 µmol(photons). m-2.s-1以上,,光閃持續(xù)時(shí)間*長(zhǎng)為150 µs(典型5-10us),,光強(qiáng)和光閃持續(xù)時(shí)間通過軟件控制。
2. 光電倍增器可以探測(cè)從300到900nm范圍的光量子,,從而測(cè)量熱發(fā)光信號(hào)和緩發(fā)熒光,。光電倍增器包括自己的電源。
3.A/D轉(zhuǎn)換器用于光電倍增器的電流放大,、軟件控制增益和數(shù)字化,,放大器的時(shí)間反應(yīng)固定在50ms,以確定*小取樣周期到100ms,。
技術(shù)參數(shù)
溫度范圍:
TL200/PMT標(biāo)準(zhǔn)版:-25 ℃ 到+70 ℃
TL 300/HT高溫版:-25 ℃ 到+190 ℃
TL 400/LT液氮版:-90 ℃ 到+70 ℃
環(huán)境光保護(hù):提供
暫無數(shù)據(jù)!