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FluorCam臺式植物多光譜熒光成像系統(tǒng)
FluorCam臺式植物多光譜熒光成像系統(tǒng)

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北京易科泰生態(tài)技術(shù)有限公司

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PSI公司**科學(xué)家Nedbal教授與公司總裁Trtilek博士等**將PAM葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)與CCD技術(shù)結(jié)合在一起,于1996年在世界上成功研制生產(chǎn)出FluorCam葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng)(Heck等,,1999,;Nedbal等,,2000;Govindjee and Nedbal,, 2000),。FluorCam葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)成為上世紀90年代葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)的重要突破,使科學(xué)家們對光合作用與葉綠素?zé)晒獾难芯恳幌伦舆M入二維世界和顯微世界,。目前PSI公司已成為世界上*權(quán)威,、使用*廣、種類*全面,、發(fā)表論文*多的葉綠素?zé)晒獬上駥I(yè)生產(chǎn)廠商,。

上左圖為上世紀90年代Nedbal等設(shè)計的FluorCam葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)(Photosynthesis Research, 66: 3-12,, 2000),,右圖為檸檬彩色圖及葉綠素?zé)晒獬上駡D(Photosynthetica, 38: 571-579,, 2000)

FluorCam臺式植物多光譜熒光成像系統(tǒng)是一款高度集成,、高度創(chuàng)新、使用方便,、應(yīng)用廣泛的高端植物活體成像技術(shù)設(shè)備,,高靈敏度CCD鏡頭、4個固定的LED光源板及控制系統(tǒng)等集成于一個暗適應(yīng)操作箱內(nèi)(還可根據(jù)需求選配第五個光源板置于頂部),,植物樣品放置在暗適應(yīng)操作箱內(nèi)的隔板上,,隔板7級高度可調(diào);光源由高穩(wěn)定性供電單元提供電源,,4個高能,、高穩(wěn)定性LED光源板均一性照在植物樣品上,成像面積可達13×13 cm,;控制系統(tǒng)通過USB與計算機相聯(lián),,并通過FluorCam軟件程序控制和采集分析數(shù)據(jù)。適用于植物葉片及果實等其它植物組織,、整株植物或培養(yǎng)的多株植物,、苔蘚地衣等低等植物、藻類等,,廣泛應(yīng)用于植物包括藻類光合生理生態(tài),、植物逆境脅迫生理與易感性、氣孔功能,、植物環(huán)境如土壤重金屬污染響應(yīng)與生物檢測,、植物抗性檢測與篩選、作物育種,、Phenotyping等研究,。

主要功能特點:

· 系統(tǒng)集成于暗適應(yīng)操作箱內(nèi),操作簡便,、便于移動,,既可在實驗室內(nèi)也可在室外進行暗適應(yīng)成像測量分析

· 高靈敏度CCD鏡頭,時間分辨率達50張每秒,,快速捕捉葉綠素?zé)晒馑沧?,成像面積達13x13cm

· 是世界上**可進行OJIP快速熒光動力學(xué)成像分析的高端葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)設(shè)備,可得到OJIP快速葉綠素?zé)晒鈩討B(tài)曲線及MoOJIP曲線初始斜率),、OJIP固定面積,、Sm(對關(guān)閉所有光反應(yīng)中心所需能量的量度)、QY,、PIPerformance Index)20多個參數(shù)

· 是世界上**可進行QA再氧化動力學(xué)成像分析的高端葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)設(shè)備,,可運行單周轉(zhuǎn)飽和光閃(STF)葉綠素?zé)晒庹T導(dǎo)動態(tài),光強在100μs內(nèi)可達到120,,000 μmol(photons)/m2.s

· 具備功能*全的,、可編輯的葉綠素?zé)晒鈱嶒灣绦颍?/span>Protocols),包括快照模式,、Fv/Fm,、Kautsky誘導(dǎo)效應(yīng)、2個葉綠素?zé)晒獯銣绶治觯∟PQ)protocolas(2套定制給光方案),、LC光響應(yīng)曲線,、PAR吸收與NDVI成像分析、QA再氧化動力學(xué)分析(選配),、OJIP快速熒光動力學(xué)分析(選配)及GFP綠色熒光蛋白成像(選配)等

· 可進行自動重復(fù)成像測量分析,,預(yù)設(shè)一個實驗程序(Protocols)、測量次數(shù)及間隔,,系統(tǒng)將自動循環(huán)運行成像測量,,并自動將數(shù)據(jù)按時間日期存入計算機(帶時間戳);還可預(yù)設(shè)兩個實驗程序(Protocols),;比如使系統(tǒng)白天自動運行Fv/Fm,,夜間自動運行NPQ分析等

· 具備雙色光化學(xué)光激發(fā)光源,標準配置為紅色和白色,,可選配紅色與藍色等雙波段光化學(xué)光,,雙色光化學(xué)光可按不同比例搭配使用,以便實驗不同光質(zhì)對作物/植物的光合效益

左圖A為100%紅色光源條件下黃瓜葉片的Fv/Fm,,左圖B為30%藍色光源條件下黃瓜葉片的Fv/Fm,;右上圖為光合作用強度隨光照強度(不同比例藍色光)的關(guān)系,右下圖為氣孔導(dǎo)度隨光照強度(不同比例藍色光)的關(guān)系

· 可運行葉綠素?zé)晒獬上瘛⒍喙庾V熒光成像,、GFP穩(wěn)態(tài)熒光成像

· 可選配TetraCam彩色成像模塊,,**成像面積20x25cm,用于葉片或植物形態(tài)成像分析和葉綠素?zé)晒獬上駥Ρ确治?/span>

· 可選配高光譜成像單元和紅外熱成像單元,,植物性狀數(shù)字化,、可視化,全面測量分析植物形態(tài),、光合效率,、生化性狀、氣孔導(dǎo)度,、脅迫與抗性等

· 可選配大型版移動式植物成像分析系統(tǒng),,成像面積35x35cm,可運行葉綠素?zé)晒獬上?、紅外熱成像及RGB成像分析

**應(yīng)用案例:

Hendrik KupperZuzana Benedikty等,,在20192月出版的《Plant Physiology》,發(fā)表了Analysis of OJIP Chlorophyll Fluorescence Kinetics and QA Reoxidation Kinetics by Direct Fast Imaging,,該研究**采用超高速成像傳感器FluorCam臺式植物葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng)與FKM多光譜顯微熒光成像系統(tǒng),,成像速度可達4000fps@640x512QA再氧化葉綠素?zé)晒鈩恿W(xué)成像測量單脈沖飽和光閃達150,,000 μmol/m2.s1,。

附:OJIP快速熒光動力學(xué)測定分析參數(shù)包括:

a) Fo:初始熒光或稱*小熒光,50μs時的熒光

b) Fj:2ms時的熒光

c) Fi:60ms時的熒光

d) P或Fm:**熒光

e) Vj=(Fj-Fo)/(Fm-Fo):j階熒光相對變量

f) Vi=(Fi-Fo)/(Fm-Fo):i階熒光相對變量

g) Mo=TRo/RC-ETo/RC=4(F300-Fo)/(Fm-Fo):熒光瞬變初始斜率,,或稱OJIP曲線初始斜率

h) Area:OJIP曲線與Fm之間的面積,,可稱為補償面積(complementary area)為了對不同樣品進行比較,Area需要標準化為:Sm=Area/(Fm-Fo),,Sm是對關(guān)閉所有光反應(yīng)中心所需能量的量度

i) Fix Area:OJIP固定面積,,OJIP曲線40微妙時的F值至1秒時的F值下面的面積

j) Sm:標準化OJIP補償面積,反映QA還原多次周轉(zhuǎn)

k) Ss=Vj/Mo:標準化OJ相補償面積,,反映單周轉(zhuǎn)QA還原

l) N=Sm/Ss=Sm Mo(1/Vj):OJIP QA還原周轉(zhuǎn)數(shù)量(between 0 and tFm

m) Phi_Po=QY=φpo=TRo/ABS=Fv/Fm,,**光量子產(chǎn)量,吸收光量子通量反應(yīng)中心初始捕獲比率

n) Psi_o=ψo=ETo/TRo=1-Vj,,捕獲光量子通量中電子傳遞光量子通量比率

o) Phi_Eo=φEo=ETo/ABS=(1-(Fo/Fm))(1-Vj),,吸收光量子通量中電子傳遞光量子通量比率,或稱電子傳遞光量子產(chǎn)量(quantum yield of electron transport at t=0

p) Phi_DoφDo1-φpo=Fo/Fm,,能量散失光量子產(chǎn)量(t=0)

q) Phi_pav=φpav=φpo(Sm/tFm),,平均光量子產(chǎn)量,tFm為達到Fm所需時間(ms)

r) ABS/RC=Mo(1/Vj)(1/QY):為單位反應(yīng)中心的吸收光量子通量,,這兒的反應(yīng)中心僅指the active (QA to QA– reducing) centers(下同),。QY=TRo/ABS=Fv/Fm

s) TRo/RC=Mo(1/Vj):單位反應(yīng)中心初始(或稱**)捕獲光量子通量(導(dǎo)致QA的還原,,也即反應(yīng)中心關(guān)閉比率B的增加)

t) ETo/RC=Mo(1/Vj)(1-Vj):單位反應(yīng)中心初始電子傳遞光量子通量

u) DIo/RC=(ABS/RC)-(TRo/RC):單位反應(yīng)中心能量散失

v) ABS/CS:單位樣品截面的吸收光量子通量,CS stands for the excited cross-section of the tested sample(下同),。ABS/CSoFo,,ABS/CSmFmTRo/CSxQY(ABS/CSx)——單位截面捕獲能量或光量子通量

w) TRo/CSoQY.Fo,;ETo/CSoφEo.Fo QY.(1-Vj).Fo

x) RC/CSx:反應(yīng)中心密度,,RC / CS0 (active RCs per excited cross-section)

y) PIABS(RC/ABS)(φpo/φDo)(ψo/Vj):基于吸收光量子通量的“性能”指數(shù)或稱生存指數(shù)

z) PIcs(RC/CSx)(φpo/φDo)(ψo/Vj):基于截面的“性能”指數(shù)或稱生存指數(shù)

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