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西班牙樣本
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西班牙Planelight公司新推出的QLS-scope是一款全新的高速光片成像平臺(tái),,這種新一代光片顯微鏡除了可以勝任傳統(tǒng)光片顯微鏡的工作外,還擴(kuò)大了支持樣品的尺寸(25 × 25 × 25 mm),,大幅提高了光片掃描樣品的速度,,是大尺寸、高質(zhì)量,、高速光片,。
作為新一代的光片系統(tǒng),QLS-scope支持自動(dòng)更換物鏡,、自動(dòng)對(duì)焦,、快速換樣、可根據(jù)樣本尺寸靈活切換觀察室,,做到節(jié)約昂貴的成像液的同時(shí)適應(yīng)各種不同尺寸的樣品,。在采集模式上QLS-scope提供多種解決方案,支持單角度,、雙角度,、四角度、SPOT,、Z-Motor五種模式,為您提供全面的大樣品組織成像方案,。
產(chǎn)品特點(diǎn): ◎ 支持單角度,、雙角度、四角度,、SPOT四種成像模式,; ◎ 可支持25 × 25 × 25 mm的大樣品; ◎ 自帶焦面校正,,采集過程中不會(huì)失焦,; ◎ 高速采集,單次1 cm樣品的信息采集僅需3 min,; ◎ 采集過程中樣品無振動(dòng)問題,,對(duì)較軟的樣品友好; ◎ 均勻無極可調(diào)寬度光片,,光片厚度僅為1μm,; ◎ 物鏡可自動(dòng)切換; ◎ 支持有機(jī)和無機(jī)的成像液,; ◎ 樣品裝載簡(jiǎn)單,,更換速度快。 | 基本參數(shù): ◎ 光片厚度:1 μm ◎ 采集模式:?jiǎn)蝹?cè),;雙,、四角度采集,;OPT; ◎ 采集速度:7-10 ms ◎ FOV:0.2 - 8 mm ◎ 樣品要求:大型透明樣品,、斑馬魚,、胚胎發(fā)育等;可兼容透明度不佳的樣品 ◎ 樣品尺寸:25 × 25 × 25 mm ◎ 支持成像液類型:有機(jī),、水 ◎ 物鏡支持范圍:1X,,2X,5X,,10X,,20X(水),40X(水),,可變物鏡 ◎ 鏡頭更換:全自動(dòng) ◎ 環(huán)境支持:CO2培養(yǎng)箱 ◎ 成像液需求:20 mL |
Qscan極速掃描技術(shù):
QLS-scope具備高速掃描技術(shù),,是可調(diào)寬度光片系統(tǒng)。能夠提供一個(gè)覆蓋全視野的均勻光片,,具有更加均勻的照明效果并且不會(huì)產(chǎn)生多光片系統(tǒng)中容易出現(xiàn)的多角度陰影,。正是由于QLS-scope具備如此均勻明亮的光片,使得QLS-scope的成像速度非???,在數(shù)分鐘內(nèi)就完成單角度光片采集。
◎ 單次采集可縮短至3分鐘 ◎ 均勻可變光片,,提供更為均勻的照明光 ◎ 光片厚度僅為1μm | 僅需三分鐘即可完成樣品的采集 |
SPOT無暗角高分辨技術(shù):
對(duì)于大樣品樣本來說,,透明化效率始終是困擾成像質(zhì)量的一個(gè)重大障礙。QLS-scope配備有獨(dú)特SPOT技術(shù),,通過將單次旋轉(zhuǎn)0.72°拍攝,,累積采500個(gè)角度的圖像進(jìn)行處理。能夠很大程度上降低由于制樣過程的瑕疵所帶來的成像質(zhì)量下降的影響,,并且為您呈現(xiàn)更為均勻,,細(xì)節(jié)更佳突出的光片圖像。
◎ 500個(gè)角度采集,,較大程度上消除陰影,; ◎ 提供光照更為均勻,細(xì)節(jié)更高的圖像,; ◎ 對(duì)透明化不佳的樣品也有不錯(cuò)的成像質(zhì)量,; | OPT模式可以提供比多角度光片更好的細(xì)節(jié) |
測(cè)試數(shù)據(jù)
小鼠尿道血管2X
小鼠腎小球2X
大鼠腦部血管7.5X
小鼠睪丸雙色成像40X
應(yīng)用案例
■ QLS-Scope多角度光片成像在小鼠心臟成像中的應(yīng)用
QLS-Scope顯微鏡具備SPIM-OPT成像模式,通過逐漸旋轉(zhuǎn)樣品并在每個(gè)層面進(jìn)行快速SPIM掃描來收集360度光學(xué)數(shù)據(jù),。軟件將不同的角度視圖重建成一個(gè)單一的數(shù)據(jù)集,。這一特性對(duì)于從數(shù)據(jù)中獲得具有代表性的3D重建圖像非常重要。
如圖所示,,比較了Single-SPIM,、Multiple-SPIM和SPIM-OPT三種方式的成像效果,。**行顯示基于Single-SPIM、Multiple-SPIM和SPIM-OPT三者獲得的數(shù)據(jù)的表面渲染圖的背側(cè)面,。Single-SPIM成像方式的圖例可見,,由于缺少來自*底層區(qū)域的成像信息,*終得到渲染不完整圖像,。Multiple-SPIM成像方式,,從另外一個(gè)角度集成光學(xué)數(shù)據(jù)在一定程度上可提高圖像質(zhì)量。需要特別注意的是SPIM-OPT成像結(jié)果中顏色深度的增加范圍**,,這樣就意味著可以得到更高分辨率的重構(gòu)圖像,。SPIM-OPT渲染無空白、無死角,,從所有角度成像都可以提取光學(xué)數(shù)據(jù),,即使是透明化程度不是極優(yōu)的樣本也能得到較好的圖像效果。第二行顯示從相同數(shù)據(jù)集計(jì)算的正交視圖,。再次證明了,,從多個(gè)角度進(jìn)行組合和重建可以顯著提高Z分辨率和質(zhì)量。
QLS-Scope顯微鏡軟件操作的簡(jiǎn)單性和高掃描速度有助于為每個(gè)樣本選擇和應(yīng)用合適的成像模式,,當(dāng)您的樣本透明化較好時(shí)候,,可以節(jié)約時(shí)間的Single-SPIM、Multiple-SPIM等掃描模式,;另外,,您也可以選擇SPIM-OPT模式,以獲得更加高Z軸分辨率的高質(zhì)量的樣本圖片結(jié)果,。
圖1 Single-SPIM、Multiple-SPIM和SPIM-OPT三種方式的成像效果圖(分別為左列,、中列,、右列)。**行顯示三種方式成像后表面渲染圖的背側(cè)面,。第二行顯示三種不同模式的樣本的正交視圖,。結(jié)果顯示,隨著軟件將重建的附加角度增加,,模型的分辨率和清晰度顯著的提高了(Scale bars 1 mm),。
■ QLS-Scope三維成像在擬南芥根系基因表達(dá)分析中的應(yīng)用
光片顯微鏡的使用可以在不干擾根系生長(zhǎng)、破壞無菌或中斷實(shí)驗(yàn)的情況下實(shí)時(shí)觀察根系,。QLS-Scope三維成像具有高分辨率,、優(yōu)化的光學(xué)特性。QLS-Scope的高速和簡(jiǎn)單性來沿著其3D路徑跟蹤根系生長(zhǎng),。下圖顯示了在生長(zhǎng)頂端和沿著中柱表達(dá)atHB8驅(qū)動(dòng)的GFP的根,。這些測(cè)量是在一個(gè)體積為2.2*3.1*0.6毫米(4.1毫米3)的單SPIM中進(jìn)行的,,只需45秒即可完成,從而縮短了設(shè)備分析和潛在實(shí)驗(yàn)改變的時(shí)間,。此外,,在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中添加稀釋的染色劑不會(huì)導(dǎo)致背景增加或明顯的生長(zhǎng)變化。
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