手機版
關于我們
加入收藏
復納科學儀器（上海）有限公司
5 年
金牌會員
金牌會員
已認證
撥打電話
獲取底價
提交后,，商家將派代表為您專人服務
復納科學儀器（上海）有限公司
金牌會員已認證
一直以來，透射電鏡（TEM）是觀察和研究超微結構的首選工具,，可用于觀察整個細胞結構，包括細胞壁,、細胞膜、細胞核和各種細胞器的變化,，以及外源物質(zhì)與細胞之間的關系等,。不僅有助于許多重要細胞器的結構和功能的研究,，而且有助于解剖病理學,、血液學和微生物學等學科的病理診斷研究。
掃描透射（STEM）模式作為 TEM 的附加配件,，可以顯著提高生物樣品的襯度,，特別是未染色的組織切片,。應對此類生物樣品，TEM 操作人員通常也會選擇相對較低的加速電壓（80kV）來增加圖像的襯度,，并提高清晰度,。但是由于其操作的復雜性,，在對細胞生物學和病理學的超微結構的研究中,，還沒有被廣泛應用（除專業(yè)的電鏡中心外）,。
飛納臺式場發(fā)射掃描電鏡,，體積小巧,，具有低電壓成像的優(yōu)勢,，配備了新型的掃描透射（STEM）探測器后,，可以結合掃描電鏡和透射電鏡的功能特點,，在 15kV 的低加速電壓下,，就可以獲得高分辨率的掃描透射成像,。在觀測電子束敏感的生物樣品時,，可以獲得高成像質(zhì)量圖片,。
以下為大家分享生物組織樣品的制樣方法以及 4 個使用 Pharos-STEM 拍攝的案例,。（加速電壓 15kV，工作距離 8.9mm）
制樣方式
對生物組織樣品進行透射電鏡成像時，制樣處理過程主要包括固定,、脫水處理,、樹脂浸潤和干燥,、切片。
具體過程如下：使用 2.5% 的戊二醇溶液（溶解于 PH 值為 7.4 的 0.1M 碳酸鈉緩沖液中）進行固定,，固定完成后，組織樣品在碳酸鈉緩沖液中清洗 1-2 天,。這個過程具體包括使用 2% 四氧化餓清洗 4h，2% 醋酸鈾清洗 1h,，醋酸鈉清洗 1h；然后使用梯度乙醇和丙酮進行脫水處理,；接著按照標準配方使用低粘度環(huán)氧樹脂 Spurr 進行包埋,，將樹脂在 70℃ 下固化 15h,；最后使用超微切片機制備 70nm 厚的組織切片,，將組織切片安裝在 300 目的銅網(wǎng)上。接下來將具有樣品的銅網(wǎng)放入 Pharos-STEM 中進行觀測,，結果如下。
01案例一
被腎小囊（Bowman's capsule）包裹的正常腎小球
圖1 小鼠腎標本樣品（腎小球和臨近的腎血管）的 STEM 圖,。紅色箭頭處可以看到含有紅細胞的腎小球毛細血管，毛細血管被腎小球基底膜和足細胞的足突包圍,。
圖1 為被腎小囊（Bowman's capsule）包裹的正常腎小球的超微結構,。 STEM 圖顯示了正常腎小球毛細血管袢和腎小球系膜,，與 TEM 下的微觀圖像類似,。STEM 圖中的紅色箭頭處清晰顯示了腎小球基底膜、系膜基質(zhì),、系膜胞質(zhì)、足細胞足突的細節(jié)以及與基底膜毗鄰的裂孔結構,。STEM 圖像顯示了高分辨的超微結構，圖像襯度明顯,，可以快速捕捉到極小的細胞變化,，并快速分析感興趣部位的微觀結構。
02案例二
正常的小鼠胰腺腺泡細胞
圖2 正常的小鼠胰腺腺泡細胞結構 STEM 圖,。圖中顯示了酶原顆粒（Z）,、液泡,、線粒體（M）,、腺泡腔（L）和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（R）。上圖為胰腺星形細胞,，下圖為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的精細結構,。
03案例三
人類腦腫瘤組織
圖 3 人類腦腫瘤組織 STEM 圖。圖中清晰顯示了細胞的超微結構特征,，髓鞘軸突,、線粒體和嵴結構（M）、包含細胞間質(zhì)纖維和囊泡的星形細胞結構（紅色箭頭處）,。圖中可以清晰觀測到細胞結構和細胞器之間的關系,。
圖4 培養(yǎng)的全能干細胞的 STEM 圖。晶狀體上皮細胞內(nèi)有大量的細胞質(zhì)器,，如線粒體和卵圓形細胞核,。均質(zhì)的細胞外觀與早期細胞分化階段的細胞相似（數(shù)據(jù)來自 ROR1e LECs）。圖中可以清晰看到晶狀體的微結構,，包括靠近組織周圍的晶狀體上皮細胞,，以及與之相鄰的具有桿狀細胞核的未成熟的晶狀體纖維細胞，具有圓形細胞核的細胞和晶狀體纖維細胞類似,。
總結Conclusion
通過以上 4 個案例,，可以看出，使用配備 STEM 探測器的飛納臺式場發(fā)射掃描電鏡,，在觀察生物類樣品時,，在較低的加速電壓下，幾分鐘內(nèi)便可以獲得高襯度、高分辨圖像,。
最新動態(tài)
更多
虛擬號將在 秒后失效
使用微信掃碼撥號
上一篇