
大昌華嘉科學(xué)儀器部

已認(rèn)證
大昌華嘉科學(xué)儀器部
已認(rèn)證
一,、樣品前處理
1、所用試劑
必須使用重蒸餾水或與之等質(zhì)的水(電導(dǎo)率<10μs)
1.1 雙氧水,30%
1.2 甲酸,,98-100%
1.3 苯酚:須重蒸
1.4 偏重亞硫酸鈉
1.5 氫氧化鈉
1.6 鹽酸,,ρ=1.18g/ml
1.7 水解劑:6mol/l 的HCL,,1L含1g苯酚;加1g苯酚(3.3)到492mL鹽酸(3.7)中,,然后用水定容至1L
1.8 20種氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品
2,、標(biāo)樣配置
氨基酸混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:稱取上述各氨基酸標(biāo)樣使用PH2.2的Load Buffer配置成2.5umol/L的儲(chǔ)備液備用。
取氨基酸混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液與PH2.2的Load Buffer以1:9的比例配置成0.25umol/L的標(biāo)準(zhǔn)液,。
3,、前處理設(shè)備
1) 天平
2) 水解管
3) 量筒
4) 無(wú)油真空泵
5) 干浴水解、濃縮儀
6) 移液管
7) 0.45um濾膜
4,、樣品制備(參考?xì)W盟飼料指令98/64/EC )
1) 樣品的準(zhǔn)備
粉碎樣品,,通過(guò)0.5mm的篩孔。高水分的樣品粉碎前必須低于50℃鼓風(fēng)干燥或者冷凍干燥,。高脂肪含量的樣品粉碎前必須用輕質(zhì)石油(3.12)脫脂,。
2) 氧化
從準(zhǔn)備好的樣品中稱取約0.1~1克樣品,準(zhǔn)確到0.2mg,,于100 ml帶螺紋蓋子的瓶子中,,稱取的樣品應(yīng)該含有大約10mg氮,水分不能超過(guò)100mg,。將瓶子放于冰水浴中冷卻至0℃,加5ml氧化試劑(過(guò)甲酸苯酚),,用帶彎頭的玻璃刮勺混合,。用空氣密封膜將瓶子和刮勺一起密封,密封后一起放入0℃冰箱的冰水浴中,,放置16小時(shí),。之后,從冰箱中取出,,加0.84克偏重亞硫酸鈉(3.4)來(lái)分解過(guò)量的氧化試劑,。
3) 水解
加入25毫升鹽酸-苯酚溶液, 然后將反應(yīng)瓶放在烘箱中,溫度控制在110攝氏度,,旋松帽子(防止玻璃瓶子破裂),,水解1小時(shí)。然后快速旋緊瓶塞(戴手套和護(hù)眼罩)將其繼續(xù)在烘箱110攝氏度下水解23小時(shí),。
4) 加入內(nèi)標(biāo)并且調(diào)節(jié)pH值到2.20
當(dāng)水解反應(yīng)結(jié)束后,,將反應(yīng)瓶從烘箱中取出,并且打開(kāi)瓶口(戴手套和護(hù)目鏡),。冷卻后用定量加樣器準(zhǔn)確加入15.00克(15毫升)正亮氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液,,混合并且轉(zhuǎn)移水解溶液到250毫升的塑料燒杯中。加入大約125毫升檸檬酸緩沖液和19毫升氫氧化鈉水溶液,將實(shí)驗(yàn)燒杯放入到樣品容器中用氫氧化鈉水溶液將溶液調(diào)節(jié)到pH為正好2.20,。
轉(zhuǎn)移一部分溶液(不需要全部)到50毫升有蓋子的塑料瓶中,。可以馬上測(cè)定或者放入冰箱等到分析的時(shí)候測(cè)定。
二,、分析方法描述(Biochrom 30+)
氨基酸分析儀分析方法參數(shù):
1) 色譜柱:Biochrom Na型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂柱,,4.6x20cm
2) 分離程序:
3) 運(yùn)行時(shí)間:分析時(shí)間65min
4) 反應(yīng)單元溫度:135°C。
5) 檢測(cè)波長(zhǎng):570nm,、440nm同時(shí)檢測(cè),。
三、外標(biāo)法定量
附,、豆粕A分析圖譜
全自動(dòng)氨基酸分析儀
由具有50年專業(yè)氨基酸分析制造經(jīng)驗(yàn)的Biochrom公司生產(chǎn),。
能夠出具無(wú)爭(zhēng)議的國(guó)際和國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)報(bào)告,為您帶來(lái)準(zhǔn)確的分析結(jié)果以及和歐美接軌的技術(shù)服務(wù)的儀器,。
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