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Calypso II品牌
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美國樣本
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定量的表征生物大分子間的相互作用,,如抗原/抗體、酶/抑制劑,、蛋白質(zhì)/多糖等重要生物學(xué)體系,,是生命科學(xué)研究及生物技術(shù)研究的關(guān)鍵。
Calypso是一個(gè)以組分-梯度多角度光散射(CG-MALLS)為基礎(chǔ)的生物大分子間相互作用分析系統(tǒng),,可以快速,、自動(dòng)、無損,、定量的表征大分子間的相互作用,,具有重復(fù)性高、靈敏度高及無需樣品修飾等諸多優(yōu)點(diǎn),。該系統(tǒng)可以分析分子間的特異性及非特異性相互作用,,聚集或解離的動(dòng)力學(xué)等。對(duì)于分子間的特異性相互作用,,Calypso可以測(cè)定其自聚作用及不同樣品分子間的異聚作用,,得到平衡解離常數(shù)Kd及反應(yīng)的化學(xué)計(jì)量數(shù)。對(duì)于非特異性相互作用,,可以測(cè)定其維力系數(shù),,并判斷分子間的作用力及強(qiáng)度。此外,,Calypso還可以測(cè)定反應(yīng)的動(dòng)力學(xué),,樣品的重均分子量及均方根半徑等重要分子信息。
Calypso分析系統(tǒng)無需對(duì)樣品進(jìn)行修飾(熒光標(biāo)記,、固定化等),且在溶液環(huán)境中測(cè)量,,因此可以**程度的保證樣品的天然狀態(tài),,從而得到其他技術(shù)難以得到的結(jié)果,*真實(shí)的表征生物大分子間的相互作用,,樣品方便回收,。
Calypso分析系統(tǒng)的工作原理:組分-梯度多角度光散射(CG-MALS)是**的分析技術(shù)之一,利用分子量的變化測(cè)定分子間的相互作用,。溶液中大分子的散射光強(qiáng)依賴于物質(zhì)的濃度C和重均分子量Mw,,分子間發(fā)生復(fù)合,Mw則增加。例如,,若所有的蛋白質(zhì)分子以二聚體形式出現(xiàn),,則散射光強(qiáng)也會(huì)增倍。對(duì)于可逆的聚集,,蛋白與單體蛋白復(fù)合的比例會(huì)達(dá)到一個(gè)平衡值,,這個(gè)值依賴于每種蛋白初始的濃度和緩沖液的條件。不同的組成和濃度會(huì)導(dǎo)致Mw不同,。通過分析一系列不同組成和濃度的光散射結(jié)果,,可以確定所發(fā)生的聚集形式、各自的結(jié)合親和力Ka,、結(jié)合和解離平衡常數(shù),。手動(dòng)配制比例及測(cè)量是一項(xiàng)繁瑣、費(fèi)時(shí)間且容易產(chǎn)生操作誤差的工作,,Calypso系統(tǒng)通過自動(dòng)化的過程克服了CG-MALS手動(dòng)操作的困難,,將樣品配制、輸送及數(shù)據(jù)的采集和分析集合于一體,,**的保證了實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性,,并解決了人工配制樣品時(shí)引入操作誤差的問題。
技術(shù)優(yōu)勢(shì)
1. 智能化配樣,消除了手動(dòng)配樣時(shí)的誤差問題,;
2. 樣品直接測(cè)試,,無需標(biāo)記化或固定化,**程度的保證了樣品的天然狀態(tài),;
3. 快速的測(cè)定時(shí)間,半小時(shí)即可測(cè)得實(shí)驗(yàn)結(jié)果,;
4. 適用于各類生物反應(yīng)體系的測(cè)定,;
5. 體系中自聚及不同樣品分子異聚的分析;
6. 化學(xué)計(jì)量點(diǎn),,平衡常數(shù)的分析,,平衡常數(shù)范圍:pM – mM;
7. 反應(yīng)動(dòng)力學(xué)的分析,;
8. 與激光檢測(cè)器,、濃度檢測(cè)器聯(lián)用,快速測(cè)定物質(zhì)的Mw,、Rg,、A2、A3,;獲取Zimm圖,;
應(yīng)用領(lǐng)域:
1. 酶反應(yīng)體系:酶與抑制劑的相互作用,,酶促動(dòng)力學(xué)等
2. 藥物探索:藥物對(duì)蛋白質(zhì)間相互作用的影響等
3. 免疫研究:抗原/抗體的相互作用等
4. 方法改進(jìn):測(cè)定及調(diào)整第二維力系數(shù),幫助純化抗體,,確定多聚體的組成,,確定樣品的**溶解條件等。
5. 結(jié)合特異性:化學(xué)計(jì)量點(diǎn),,平衡常數(shù),,離子強(qiáng)度、pH或者輔料對(duì)多聚物或者蛋白結(jié)合的影響等,。
6. 多分子復(fù)合物的結(jié)構(gòu)分析:在一系列緩沖溶液,、時(shí)間、溫度變化下,,表征大分子聚集過程中分子間的結(jié)合強(qiáng)度,, 以及確定其化學(xué)計(jì)量關(guān)系,通過Mw及Rg判斷其空間構(gòu)型,。
1. 智能化配樣,,消除了手動(dòng)配樣時(shí)的誤差問題;
2. 樣品直接測(cè)試,,無需標(biāo)記化或固定化,,最大程度的保證了樣品的天然狀態(tài);
3. 快速的測(cè)定時(shí)間,,半小時(shí)即可測(cè)得實(shí)驗(yàn)結(jié)果,;
4. 適用于各類生物反應(yīng)體系的測(cè)定;
5. 體系中自聚及不同樣品分子異聚的分析,;
6. 化學(xué)計(jì)量點(diǎn),,平衡常數(shù)的分析,平衡常數(shù)范圍:pM – mM,;
7. 反應(yīng)動(dòng)力學(xué)的分析,;
8. 與激光檢測(cè)器、濃度檢測(cè)器聯(lián)用,,快速測(cè)定物質(zhì)的Mw,、Rg、A2,、A3,;獲取Zimm圖;