看了便攜式浮游植物流式細(xì)胞儀的用戶又看了
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這是全球**款專業(yè)做浮游植物研究的流式細(xì)胞儀,,可對大小在0.4 mm-4 mm的浮游植物進行分析。儀器整合式設(shè)計,,結(jié)構(gòu)堅固,,適合野外使用,且儀器移動后無需另外校準(zhǔn),。 1) 可在室內(nèi)或調(diào)查船上使用 2) 防濺水設(shè)計 3) 可升級為CytoSub和CytoBuoy 4) 特殊版本CytoSense GV可直接測量帶氣囊的浮游植物(如微囊藻) |
工作原理細(xì)胞/顆粒流過流動池(1)的檢測區(qū)域時,,被激光照射(2)。樣品被中空針管(3)注入錐狀注射器(4)中,,被不含任何顆粒的鞘液(樣品的濾液,,由儀器自動過濾提供)(5)包裹著流過1000 mm2石英毛細(xì)管。鞘液包繞著樣品高速流動,,組成一個圓形的流束,,待測細(xì)胞在鞘液的包被下單行排列(6),依次通過檢測區(qū)域,。這個過程中,,顆粒(7)間的距離被拉開,當(dāng)顆粒被與之呈90度角的激光束(2)照射(8)時,,顆粒的散射光和熒光會被檢測系統(tǒng)(9)檢測,。入射到檢測系統(tǒng)的光束(10)被收集物鏡(12)、光譜反射鏡(13)處理后被檢測器(11)檢測,。 |
流動單元
鞘液的供給量由泵精確控制,。特制的鞘液入口大大降低了鞘液的剪切力,有助于保持脆弱細(xì)胞(或群體)的完整性,。特制的兩步注入系統(tǒng)有效防止了由于船或浮標(biāo)的波動引起的樣品流偏移,,同時也為空氣留了一個通路。鞘液系統(tǒng)是一個自我循環(huán)系統(tǒng),,不需額外添加,,不需廢液收集瓶。過濾生產(chǎn)鞘液的濾膜可以持續(xù)工作數(shù)月,。特制齒輪泵用于為過濾鞘液施加壓力,。 |
CytoSense GV型——可分析帶氣囊的浮游植物
有些浮游植物(如微囊藻)帶有氣囊。氣囊會改變光散射,,從而會改變這類浮游植物的“光學(xué)指紋”,。通過施加瞬間高壓可以打破氣囊,,從而消除由于氣囊引起的光散射變化,修復(fù)“光學(xué)指紋”,。通過兩次測量可以方便的區(qū)分出帶氣囊的種:**次直接測量,,第二次施加高壓破壞氣囊后測量。那些在施加高壓后改變了光散射的種就是帶氣囊的種,。
CytoSense的特殊版本——CytoSense GV型可以滿足上述要求,。CytoSense GV型就是在CytoSense的基礎(chǔ)上增加一個高壓模塊。這個高壓模塊可以提供瞬間高壓用于破壞氣囊,。這個過程可以由軟件自動完成,。
CytoSense應(yīng)用于高濁度水體的對策
針對我國很多水體濁度高、泥沙含量高的特點,,根據(jù)國內(nèi)用戶需求,,澤泉科技有限公司與荷蘭CytoBuoy公司合作提出如下解決方案:
1)進樣篩選 水樣被進樣器采集后,在進樣器內(nèi)部經(jīng)過篩選排除空氣和砂粒(圖1),。進樣器內(nèi)部設(shè)計非常獨特,,從上到下有三個出水口,其中上邊的出水口用于排除空氣,,多數(shù)砂粒由于沉降速率較大會經(jīng)下部出水口排除,,只有中間的出水口用于采集浮游植物、浮游動物和與它們密度相差不大的砂粒進行流式細(xì)胞計數(shù)和其它分析,。
如果水中砂粒粒徑很大,,可以在進樣器中增加一個不銹鋼篩網(wǎng),用于濾除粒徑大于1 mm的泥沙顆粒,。
對于多數(shù)粒徑大于50-100 um的砂粒而言,,它們的沉降速率大于CytoSense的進樣流速(1-2 cm/s),因此不會被進樣器吸入,。
2)外置鞘液系統(tǒng)
CytoBuoy系列浮游植物流式細(xì)胞儀(包括CytoSense,、CytoBuoy和CytoSub)的一個重大創(chuàng)新就是不用外加鞘液,而是直接采用水樣的過濾液作為鞘液,,這樣既節(jié)省了用戶的成本,,也省去了更換鞘液的麻煩,同時還避免了流路發(fā)生生物污染的可能,。但是由于樣品過濾生成的鞘液量不是很大,,在測量高濁度水體樣品時,就難于避免水體中黃色物質(zhì)發(fā)出的熒光的影響,。另外,,對于類似我國黃河水體、或者洪水期的長江水體而言,,泥沙顆粒非常多,,可能每100個顆粒中只有1-5個浮游植物細(xì)胞(甚至有可能每1000個顆粒中只有1個浮游植物細(xì)胞),,其它都是泥沙顆粒,這極大增加了浮游植物計數(shù)的難度,。但即使是這樣的水樣,,CytoSense也是可以測量的。為了達到更好的分析效果,,建議采用如下的外置鞘液系統(tǒng)。
外置鞘液系統(tǒng)的鞘液采用蒸餾水或市場上購買的桶裝水皆可,。自來水由于含氯,,對浮游植物活性有影響,因此不建議使用,。其它類似PBS緩沖液等也可作為鞘液,,只是比蒸餾水或桶裝水的獲取更麻煩,成本更高,。鞘液桶采用容量20-30升的塑料桶即可,。根據(jù)工作模式,可分為外置非循環(huán)鞘液系統(tǒng)和外置循環(huán)鞘液系統(tǒng),。
外置非循環(huán)鞘液系統(tǒng)(圖2):鞘液一次性使用,,用完即排出不在使用。連續(xù)工作1小時約需5升鞘液,,工作1天約需50升鞘液,。
外置循環(huán)鞘液系統(tǒng)(圖3):鞘液使用后經(jīng)循環(huán)過濾系統(tǒng)可重復(fù)利用,大大節(jié)省了鞘液用量,。由于循環(huán)使用鞘液,,水體樣品中的黃色物質(zhì)會流入鞘液中,盡管被稀釋,,但還是會產(chǎn)生微弱的熒光,。因此建議鞘液桶足夠多(20-30升),以盡量降低黃色物質(zhì)熒光引起的誤差,。同時建議每天更換新的鞘液,。
通過以上這些設(shè)計,CytoSense完全可以直接測量高濁度水體樣品(如洪水期的長江水樣,、長江口水樣),,可以對水中總顆粒進行計數(shù)。通過樣品是否發(fā)出熒光,,可以區(qū)分浮游植物和其它顆粒,。通過多色熒光,可以對浮游植物進行聚類分析,。通過浮游植物專家?guī)?,可以對多?shù)非球狀西部鑒定到種,。當(dāng)然,如果結(jié)合GV模塊(自動破碎微囊藻的囊),,還可以對微囊藻(不需預(yù)處理)直接測量,。
暫無數(shù)據(jù)!