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Afla M1試驗(yàn)方法

 快速——一次試驗(yàn)只需不到15分鐘（不包括樣品制備）,。

 靈敏——檢測(cè)限可至10ppt。

 回收率高——回收率為75%—95%,。

 操作簡(jiǎn)單——不需特殊的訓(xùn)練,，在任何地方都可以完整地進(jìn)行試驗(yàn)。

 安全——與普通方法相比,，所用的材料基本無(wú)毒性,。

黃曲霉毒素M1是存在于牛奶中的一種毒素，從已攝入的黃曲霉毒素衍生而成,。黃曲霉毒素已經(jīng)被證明是一類致癌物,，對(duì)人體容易產(chǎn)生癌癥。黃曲霉毒素M1的檢測(cè)十分嚴(yán)格，因?yàn)樗嬖谟趮雰?、兒童,、成人每天食用的牛奶中。世界各?guó)對(duì)奶制品中黃曲霉毒素M1的含量都有嚴(yán)格的的規(guī)定,。VICAM研制開(kāi)發(fā)的Afla M1是一種流動(dòng)很快的親合柱,，視樣品的種類不同，其回收率為75%至95%,。

VICAM公司的Afla M1是一種快速的黃曲霉毒素試驗(yàn)方法,，能夠產(chǎn)生準(zhǔn)確定量的試驗(yàn)結(jié)果。Afla M1試驗(yàn)方法應(yīng)用了單克隆親合色譜法,，能夠?qū)ⅫS曲霉毒素M1從奶制品中分離出來(lái)。

Afla M1試驗(yàn)方法既安全又簡(jiǎn)單,，不需要特殊的技能,。這種方法可以真正稱得上靈敏、簡(jiǎn)單,、快速,，是檢測(cè)ppb、ppt級(jí)黃曲霉毒素M1的快速試驗(yàn)方法,。Afla M1也是HPLC分析方法*理想的凈化步驟,。

另外，Afla M1還具有很長(zhǎng)的保存時(shí)間（1年）,。Afla M1試驗(yàn)方法快速,、準(zhǔn)確、經(jīng)濟(jì),，事實(shí)上,，全世界沒(méi)有另外一種方法可以與之相媲美。

Afla M1試驗(yàn)方法操作步驟簡(jiǎn)介：

1． 樣品制備

 稱量樣品,。

 離心分離,。

2． 吸附、淋洗

 將樣品通過(guò)Afla M1親合柱,。

 用水清洗Afla M1親合柱,。

 用乙腈甲醇將黃曲霉毒素從親合柱上淋洗下來(lái)，并收集于試管中,。

3． 測(cè)定

 將淋洗液注入HPLC中,。

 用HPLC測(cè)定黃曲霉毒素M1的濃度。

訂貨指南

C/N G1007 Afla M1 親合柱 （25個(gè)/包）,。

C/N G1106 Afla M1泵流工作臺(tái)（包括泵和注射器管）,。

C/N 34000 試管（250個(gè)/包）。

C/N 21000 試管架。

C/N 20700 洗瓶（500ml）,。

維康4EX系列黃曲霉毒素M1分析系統(tǒng)是美國(guó)Vicam維康公司的**技術(shù)產(chǎn)品,，采用免疫親和柱凈化分離，熒光計(jì)定量檢測(cè),。2003年2月21日被國(guó)家標(biāo)委會(huì)正式批準(zhǔn)了國(guó)標(biāo)方法“乳和乳粉中黃曲霉毒素M1的測(cè)定-免疫親和層析凈化高效液相色譜法和熒光光度法” (GBT18980-2003),，2010年3月26日又被衛(wèi)生部批準(zhǔn)為“食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 乳和乳制品中黃曲霉毒素M1的測(cè)定”（GB 5413.37-2010）。

以前,，黃曲霉毒素M1分析系統(tǒng)一般采用薄層色譜法（TLC）,、高效液相色譜法（HPLC）和酶聯(lián)吸附免疫法（ELISA）。TLC雖然簡(jiǎn)便,，但靈敏度差,；HPLC雖然靈敏度高，但樣品處理煩瑣,，操作復(fù)雜,，儀器昂貴。ELISA重復(fù)性差,、試劑壽命短需要低溫保存,。此外，這些方法都具有如下共同的不足之處：（1）在操作過(guò)程中,，需要使用劇毒的真菌毒素作為標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)物,，對(duì)操作人員造成巨大的沾污危險(xiǎn)。（2）在對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理過(guò)程中,，需要使用多種有毒,、異味的有機(jī)溶劑，不僅毒害操作人員,，而且污染環(huán)境,。（3）操作過(guò)程煩瑣、時(shí)間長(zhǎng),，勞動(dòng)強(qiáng)度大,。（4）儀器設(shè)備復(fù)雜、笨重,，難以實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)快速分析,。（5）靈敏度較差，無(wú)法滿足歐盟等國(guó)的標(biāo)準(zhǔn)要求,。

為了開(kāi)發(fā)一種簡(jiǎn)單、快速,、靈敏,、準(zhǔn)確的分析方法，美國(guó)VICAM（維康）公司與哈佛大學(xué),、麻省理工學(xué)院,、約瀚-霍普金斯大學(xué)、AOAC,、FDA,、FGIS、美國(guó)農(nóng)業(yè)部等**大學(xué)和政府機(jī)構(gòu)通力合作,，發(fā)明研制了一系列的以單克隆免疫親合柱為分離手段,，用熒光計(jì)、紫外燈作為檢測(cè)工具的分析方法,。維康技術(shù)具有如下特點(diǎn) ：（1）是AOAC（美國(guó)職業(yè)分析家協(xié)會(huì)）,、IUPAC（國(guó)際純粹與應(yīng)用化學(xué)協(xié)會(huì)）、USDA-FGIS（美國(guó)農(nóng)業(yè)部聯(lián)邦谷物檢測(cè)中心）,、USDA-GIPSA（美國(guó)農(nóng)業(yè)部谷物檢測(cè),、包裝、貯存行政署）認(rèn)證的官方方法,，其檢測(cè)結(jié)果在世界各地均能得以認(rèn)可。（2）分析速度快,，一個(gè)樣品只需10-15分鐘,，而其它傳統(tǒng)方法均需要幾個(gè)小時(shí)至幾天時(shí)間。（3）靈敏度高,，測(cè)定范圍寬（0.1-300ppb），用熒光計(jì)法檢測(cè)可以測(cè)定0.025ppb的黃曲霉毒素M1,，用HPLC檢測(cè)可以測(cè)定10ppt的黃曲霉毒素M1,。而中國(guó)和國(guó)際對(duì)黃曲霉毒素M1的限量要求是0.5ppb。（4）采用單克隆抗體免疫技術(shù),，可以特效性地將黃曲霉毒素M1或其它真菌毒素分離出來(lái),，分離效率和回收率高，正確性和可靠性強(qiáng),。（5）儀器設(shè)備輕便容易攜帶,，自動(dòng)化程度高，操作簡(jiǎn)單,，直接讀出測(cè)試結(jié)果,，高中文化水平者即可勝任，可以在小型實(shí)驗(yàn)室或現(xiàn)場(chǎng)使用,。（6）不需要?jiǎng)《镜狞S曲霉毒素M1及其它真菌毒素標(biāo)準(zhǔn)物來(lái)標(biāo)定,，所以整個(gè)試驗(yàn)操作過(guò)程中，**安全可靠。（7）利用同一臺(tái)儀器和相似的分析方法,，還可以檢測(cè)黃曲霉毒素總量,、黃曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A,、伏馬毒素,、玉米赤霉烯酮、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON或稱嘔吐毒素）和T-2毒素,。(8)在2002年由國(guó)家認(rèn)證認(rèn)可監(jiān)督管理委員會(huì)實(shí)驗(yàn)室部負(fù)責(zé)組織的黃曲霉毒素能力測(cè)試中,，全部達(dá)到滿意和合格。

目前,，中國(guó)采用維康技術(shù)分析黃曲霉毒素M1的用戶包括：檢驗(yàn)檢疫系統(tǒng)（廣東,、珠海、中山,、山東,、煙臺(tái)、濰坊,、威海,、榮成、臨沂,、日照,、天津、遼寧,、沈陽(yáng),、葫蘆島、錦州,、北京,、上海、廈門(mén),、湖北,、重慶、四川,、河北,、內(nèi)蒙古、包頭,、二連,、黑龍江、齊齊哈爾）,，質(zhì)檢系統(tǒng)（上海,、北京,、杭州、濰坊,、淄博,、壽光、肥城,、大連,、山西、哈爾濱,、西安）,，北京CDC、陜西CDC,、延安CDC,、江西藥食檢、上海食藥所,、天津農(nóng)科院,、新疆農(nóng)科院、四川農(nóng)科院,、河南農(nóng)科院,、上海光明（農(nóng)業(yè)部乳品檢測(cè)中心）、黑龍江完達(dá)山（農(nóng)業(yè)部乳品檢測(cè)中心）,、山東華盛食品,、天津雀巢、廣東美贊誠(chéng),、上海味好美、深圳南山衛(wèi)生防疫站等,。檢測(cè)黃曲霉毒素總量和B1的用戶還有300多家,。可以檢測(cè)的樣品包括：牛奶,、奶粉,、奶制品、大米,、面粉,、醬油、植物油,、醋,、花生、花生醬,、花生油,、核桃,、胡桃、杏仁,、咖啡,、玉米、蜂蜜,、谷物,、高粱、大豆,、醬,、蔬菜,、胡椒,、辣椒,、中藥材,、煙草、啤酒,、小麥,、棉籽,、燕麥、飼料等,。