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Afla M1試驗(yàn)方法
快速——一次試驗(yàn)只需不到15分鐘(不包括樣品制備)。
靈敏——檢測限可至10ppt,。
回收率高——回收率為75%—95%,。
操作簡單——不需特殊的訓(xùn)練,在任何地方都可以完整地進(jìn)行試驗(yàn),。
安全——與普通方法相比,,所用的材料基本無毒性。
黃曲霉毒素M1是存在于牛奶中的一種毒素,,從已攝入的黃曲霉毒素衍生而成。黃曲霉毒素已經(jīng)被證明是一類致癌物,,對(duì)人體容易產(chǎn)生癌癥,。黃曲霉毒素M1的檢測十分嚴(yán)格,因?yàn)樗嬖谟趮雰?、兒童,、成人每天食用的牛奶中。世界各國?duì)奶制品中黃曲霉毒素M1的含量都有嚴(yán)格的的規(guī)定,。VICAM研制開發(fā)的Afla M1是一種流動(dòng)很快的親合柱,,視樣品的種類不同,其回收率為75%至95%,。
VICAM公司的Afla M1是一種快速的黃曲霉毒素試驗(yàn)方法,,能夠產(chǎn)生準(zhǔn)確定量的試驗(yàn)結(jié)果。Afla M1試驗(yàn)方法應(yīng)用了單克隆親合色譜法,,能夠?qū)ⅫS曲霉毒素M1從奶制品中分離出來,。
Afla M1試驗(yàn)方法既安全又簡單,不需要特殊的技能,。這種方法可以真正稱得上靈敏,、簡單、快速,,是檢測ppb,、ppt級(jí)黃曲霉毒素M1的快速試驗(yàn)方法。Afla M1也是HPLC分析方法*理想的凈化步驟,。
另外,,Afla M1還具有很長的保存時(shí)間(1年)。Afla M1試驗(yàn)方法快速,、準(zhǔn)確,、經(jīng)濟(jì),事實(shí)上,,全世界沒有另外一種方法可以與之相媲美,。
Afla M1試驗(yàn)方法操作步驟簡介:
1. 樣品制備
稱量樣品。
離心分離。
2. 吸附,、淋洗
將樣品通過Afla M1親合柱,。
用水清洗Afla M1親合柱。
用乙腈甲醇將黃曲霉毒素從親合柱上淋洗下來,,并收集于試管中,。
3. 測定
將淋洗液注入HPLC中。
用HPLC測定黃曲霉毒素M1的濃度,。
訂貨指南
C/N G1007 Afla M1 親合柱 (25個(gè)/包),。
C/N G1106 Afla M1泵流工作臺(tái)(包括泵和注射器管)。
C/N 34000 試管(250個(gè)/包),。
C/N 21000 試管架,。
C/N 20700 洗瓶(500ml)。
維康4EX系列黃曲霉毒素M1分析系統(tǒng)是美國Vicam維康公司的**技術(shù)產(chǎn)品,,采用免疫親和柱凈化分離,,熒光計(jì)定量檢測。2003年2月21日被國家標(biāo)委會(huì)正式批準(zhǔn)了國標(biāo)方法“乳和乳粉中黃曲霉毒素M1的測定-免疫親和層析凈化高效液相色譜法和熒光光度法” (GBT18980-2003),,2010年3月26日又被衛(wèi)生部批準(zhǔn)為“食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 乳和乳制品中黃曲霉毒素M1的測定”(GB 5413.37-2010),。
以前,黃曲霉毒素M1分析系統(tǒng)一般采用薄層色譜法(TLC),、高效液相色譜法(HPLC)和酶聯(lián)吸附免疫法(ELISA),。TLC雖然簡便,但靈敏度差,;HPLC雖然靈敏度高,,但樣品處理煩瑣,操作復(fù)雜,,儀器昂貴,。ELISA重復(fù)性差、試劑壽命短需要低溫保存,。此外,,這些方法都具有如下共同的不足之處:(1)在操作過程中,需要使用劇毒的真菌毒素作為標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)物,,對(duì)操作人員造成巨大的沾污危險(xiǎn),。(2)在對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理過程中,需要使用多種有毒,、異味的有機(jī)溶劑,,不僅毒害操作人員,而且污染環(huán)境,。(3)操作過程煩瑣,、時(shí)間長,,勞動(dòng)強(qiáng)度大。(4)儀器設(shè)備復(fù)雜,、笨重,,難以實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場快速分析。(5)靈敏度較差,,無法滿足歐盟等國的標(biāo)準(zhǔn)要求,。
為了開發(fā)一種簡單、快速,、靈敏,、準(zhǔn)確的分析方法,美國VICAM(維康)公司與哈佛大學(xué),、麻省理工學(xué)院,、約瀚-霍普金斯大學(xué)、AOAC,、FDA、FGIS,、美國農(nóng)業(yè)部等**大學(xué)和政府機(jī)構(gòu)通力合作,,發(fā)明研制了一系列的以單克隆免疫親合柱為分離手段,用熒光計(jì),、紫外燈作為檢測工具的分析方法,。維康技術(shù)具有如下特點(diǎn) :(1)是AOAC(美國職業(yè)分析家協(xié)會(huì))、IUPAC(國際純粹與應(yīng)用化學(xué)協(xié)會(huì)),、USDA-FGIS(美國農(nóng)業(yè)部聯(lián)邦谷物檢測中心),、USDA-GIPSA(美國農(nóng)業(yè)部谷物檢測、包裝,、貯存行政署)認(rèn)證的官方方法,,其檢測結(jié)果在世界各地均能得以認(rèn)可。(2)分析速度快,,一個(gè)樣品只需10-15分鐘,,而其它傳統(tǒng)方法均需要幾個(gè)小時(shí)至幾天時(shí)間。(3)靈敏度高,,測定范圍寬(0.1-300ppb),,用熒光計(jì)法檢測可以測定0.025ppb的黃曲霉毒素M1,用HPLC檢測可以測定10ppt的黃曲霉毒素M1,。而中國和國際對(duì)黃曲霉毒素M1的限量要求是0.5ppb,。(4)采用單克隆抗體免疫技術(shù),可以特效性地將黃曲霉毒素M1或其它真菌毒素分離出來,,分離效率和回收率高,,正確性和可靠性強(qiáng),。(5)儀器設(shè)備輕便容易攜帶,自動(dòng)化程度高,,操作簡單,,直接讀出測試結(jié)果,高中文化水平者即可勝任,,可以在小型實(shí)驗(yàn)室或現(xiàn)場使用,。(6)不需要?jiǎng)《镜狞S曲霉毒素M1及其它真菌毒素標(biāo)準(zhǔn)物來標(biāo)定,所以整個(gè)試驗(yàn)操作過程中,,**安全可靠,。(7)利用同一臺(tái)儀器和相似的分析方法,還可以檢測黃曲霉毒素總量,、黃曲霉毒素B1,、赭曲霉毒素A、伏馬毒素,、玉米赤霉烯酮,、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON或稱嘔吐毒素)和T-2毒素。(8)在2002年由國家認(rèn)證認(rèn)可監(jiān)督管理委員會(huì)實(shí)驗(yàn)室部負(fù)責(zé)組織的黃曲霉毒素能力測試中,,全部達(dá)到滿意和合格,。
目前,中國采用維康技術(shù)分析黃曲霉毒素M1的用戶包括:檢驗(yàn)檢疫系統(tǒng)(廣東,、珠海,、中山、山東,、煙臺(tái),、濰坊、威海,、榮成,、臨沂、日照,、天津,、遼寧、沈陽,、葫蘆島,、錦州、北京,、上海,、廈門、湖北,、重慶,、四川,、河北、內(nèi)蒙古,、包頭,、二連、黑龍江,、齊齊哈爾),,質(zhì)檢系統(tǒng)(上海、北京,、杭州,、濰坊、淄博,、壽光,、肥城、大連,、山西,、哈爾濱、西安),,北京CDC,、陜西CDC、延安CDC,、江西藥食檢,、上海食藥所,、天津農(nóng)科院,、新疆農(nóng)科院、四川農(nóng)科院,、河南農(nóng)科院,、上海光明(農(nóng)業(yè)部乳品檢測中心)、黑龍江完達(dá)山(農(nóng)業(yè)部乳品檢測中心),、山東華盛食品,、天津雀巢、廣東美贊誠,、上海味好美,、深圳南山衛(wèi)生防疫站等。檢測黃曲霉毒素總量和B1的用戶還有300多家,??梢詸z測的樣品包括:牛奶、奶粉,、奶制品,、大米,、面粉、醬油,、植物油,、醋、花生,、花生醬,、花生油、核桃,、胡桃,、杏仁、咖啡,、玉米,、蜂蜜、谷物,、高粱,、大豆、醬,、蔬菜,、胡椒、辣椒,、中藥材,、煙草、啤酒,、小麥,、棉籽、燕麥,、飼料等,。
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