編號：NMJS01544
篇名：殼聚糖納米纖維支架對豬肝細胞分泌豬內(nèi)源性逆轉錄病毒的影響
作者：韓冰,； 施曉雷； 肖江強,； 張悅,； 褚薛慧； 顧勁揚,； 顧忠澤,； 丁義濤；
關鍵詞：殼聚糖納米纖維支架,； 豬肝細胞,； 豬內(nèi)源性逆轉錄病毒； 生物人工肝,；
機構： 南京大學醫(yī)學院附屬鼓樓醫(yī)院肝膽外科,； 南京醫(yī)科大學鼓樓臨床學院肝膽外科； 東南大學生物電子學國家重點實驗室,；
摘要： 探討殼聚糖納米纖維支架對肝細胞的PERV分泌量以及其感染性的影響,。將新鮮分離的豬肝細胞接種于殼聚糖納米纖維支架或普通條件下連續(xù)培養(yǎng)7 d,分為實驗組(Nano組)和對照組(Hep組)。每天收集培養(yǎng)液檢測逆轉錄酶(RT)活性,并通過RT-PCR和實時定量PCR測定PERV RNA水平,。通過western blot檢測細胞裂解液中PERV gag 30蛋白含量,。細胞培養(yǎng)液體外孵育HEK293細胞以測定其感染性。結果表明:實時定量PCR,、RT活性以及western blot具有相似的變化趨勢,。在體外培養(yǎng)10 h和2 d出現(xiàn)PERV分泌高峰然后逐漸下降。除第6 dPERV RNA水平和第5 d蛋白水平實驗組明顯高于對照組外,其余均無明顯差異,。體外感染實驗無HEK293細胞感染,。殼聚糖納米纖維支架會延長豬肝細胞的PERV分泌時間但對分泌量以及體外感染性并無明顯影響,可安全用于生物人工肝。
