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Pure系統(tǒng)以更大的回收率
純化根莖川芎提取物中的阿魏酸
Pure 應(yīng)用
1
介紹
藥用植物是藥物開(kāi)發(fā)的重要資源,。在生物化學(xué)，制藥及臨床研究中通常會(huì)分析它們的復(fù)雜成分及生物活性成分,。眾所周知,，阿魏酸是在根莖川芎中發(fā)現(xiàn)的最主要的生物活性成分「1」。使用 Pure Flash 色譜系統(tǒng)分離純化該植物提取物,，并鑒定其中的稀有成分,。
2
實(shí)驗(yàn)條件
萃取條件 | ||
萃取類(lèi)型 | 研磨 | |
重量 | 2g | |
萃取溶劑 | 乙醚 | |
溶劑體積 | 40ml | |
超聲波提取 | 20min | |
Flash 色譜條件 | ||
色譜柱 | Slica 12g | |
進(jìn)樣模式 | 液體 | |
溶劑A | 正己烷 | |
溶劑B | 乙酸乙酯 | |
UV1 | 280nm | |
UV2 | 254nm | |
流速 | 25ml/min | |
ELSD載氣 | 空氣 | |
柱平衡 | 3.0min | |
流動(dòng)相條件 | ||
步驟 | 時(shí)間 | %B |
1 | 0.0 | 0 |
2 | 3.0 | 5 |
3 | 8.8 | 5 |
4 | 0.5 | 6 |
5 | 2.6 | 33 |
6 | 5.2 | 98 |
7 | 2.6 | 98 |
Flash 分離結(jié)果 |
▲ 圖1：對(duì)根莖川芎提取物的分離說(shuō)明使用紫外檢測(cè)器和蒸發(fā)光散射檢測(cè)器可以對(duì)峰進(jìn)行檢測(cè)。
分析型 HPLC 色譜條件 | ||
色譜柱 | AlltimaTM 硅膠柱,5μm,250×4.6 mm | |
進(jìn)樣模式 | 液體 | |
溶劑A | 正己烷+1%甲酸 | |
溶劑B | 乙酸乙酯+1%甲酸 | |
UV1 | 280nm | |
流速 | 1.0ml/min | |
流動(dòng)相條件 | ||
步驟 | 時(shí)間 | %B |
1 | 0.0 | 0 |
2 | 10.0 | 50 |
3 | 20.0 | 100 |
分析型 HPLC 分離結(jié)果 |
▲ 圖2：阿魏酸回收率 =97%(用峰面積來(lái)計(jì)算)
3
結(jié)論
使用高靈敏度的 Pure Flash 色譜系統(tǒng),，對(duì)低含量植物萃取物中的重要成分進(jìn)行分離和收集,。在同一運(yùn)行過(guò)程中，可以使用 UV 檢測(cè)器檢測(cè)發(fā)色團(tuán)的峰和 ELSD 技術(shù)來(lái)檢測(cè)非發(fā)色團(tuán)的峰,，進(jìn)行餾分收集和進(jìn)一步分析,。這樣可以純化天然產(chǎn)物提取物中的化合物和不容易用傳統(tǒng) Flash 色譜系統(tǒng)檢測(cè)的低含量的有藥效的化合物。
4
參考文獻(xiàn)
Chen, X.; Kong, L.; Su, X.; Fu, H.; Ni, J.; Zhao, R.; Zou, H.; Separation and identification of compounds in Rhizoma chuanxiong by comprehensive two-dimensional liquid chromatography coupled to mass spectrometry; J. Chromatograpy A, 1040, (2004), pp. 169-178.
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