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【瑞士步琦】使用凱氏定氮儀要注意些什么?步琦來解答,,助您實驗一臂之力

【瑞士步琦】使用凱氏定氮儀要注意些什么?步琦來解答,,助您實驗一臂之力
步琦  2023-11-09  |  閱讀:864

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步琦凱氏定氮儀的注意事項及維護(hù)

凱氏定氮法是測定蛋白質(zhì)/氮的常用方法,,該方法簡單易操作,但由于實驗過程中涉及到的步驟(消化→蒸餾→滴定)以及使用的試劑較多,,因此出現(xiàn)問題后排查起來會費時費力,。


本文集合了客戶了經(jīng)常面臨的問題,,并一一給予解決方法,,旨在幫助客戶實驗過程中能快速發(fā)現(xiàn)問題,,并及時排查解決掉。


1 消解儀使用注意事項

快速消解儀為實驗室應(yīng)用而設(shè)計和構(gòu)建的,。用途是通過加熱用濃硫酸在催化劑作用下消解樣品,。抽吸裝置(如尾氣吸收儀 K-415 或水射泵(訂貨號 002913)必須連接到抽吸模塊上,以安全排出消解過程中出現(xiàn)的煙霧,。


在使用前,,需要檢查以下事項:

  • 樣品管是否完好,,如果發(fā)現(xiàn)樣品管破損(如有裂痕,劃痕或者撞擊的痕跡)立即更換新的樣品管,,另外樣品管在使用一段時間也應(yīng)及時換新,,建議使用 2~3 年后更換新樣品管1,,訂貨號037377(300mL,,4pcs)或11059690(300mL,20pcs),,以保證安全,。

  • 水射泵側(cè)管需低于煙霧收集管出口,防止煙霧冷凝在管路里邊影響抽氣力度,,可能降低消解效率,。


消解過程中,,需要注意:

  • 水射泵流速要適當(dāng),不能為了節(jié)約水流速過低,,不能提供合適的負(fù)壓帶走煙霧。

  • 硫酸不宜過少,,防止干燒損壞樣品管,。

  • 加熱盡量按照指導(dǎo)逐漸升溫,,防止樣品濺到試管壁上導(dǎo)致消解不完全,影響結(jié)果,。

  • 注意催化劑的比例和廠家品牌,,防止鹽過多,冷卻后析出影響消解管的安裝,。

  • 如果發(fā)現(xiàn)有大量煙霧冒出,液體噴濺,。請立即斷電,加大通風(fēng),,待樣品管冷卻后再進(jìn)行操作,。檢查抽氣泵是否正常工作,以及玻璃和密封圈是否完好,。


消解結(jié)束后,,需要注意:

  • 在完成消解后 30min 內(nèi)請勿使用立即冷水清洗樣品管或者直接蒸餾,。溫度差過大會導(dǎo)致玻璃自身產(chǎn)生形變而出現(xiàn)裂痕。需待冷卻完全后,,再清洗樣品管,并檢查是否玻璃完好,。

  • 要想延長密封件的使用壽命,,經(jīng)常用水對其進(jìn)行清洗,然后用軟布擦干清洗過的密封件,。


明確禁止以下使用:

  • 在通風(fēng)柜外進(jìn)行消解操作

  • 在濃硫酸中消解樣品(如食物和飼料)時,,可產(chǎn)生爆炸性硝基化合物。

  • 在濃硫酸中對不明成分的樣品材料進(jìn)行消解,。

  • 使用在沖擊、摩擦,、加熱或火花的情況下可引起爆炸或燃燒的樣品,。


鋁塊消解儀:

K-446 在使用前除了需要檢查以上所需事項外,,在使用后還需注意:


  • 消解完后,廢液承接盤一定要放置在煙霧收集管底部,,防止酸滴到加熱模塊上腐蝕設(shè)備,。

  • 加熱模塊上面的雜質(zhì)需及時清理干凈,以免影響加熱效率,。

  • 煙霧收集管需及時清潔,,減少對玻璃的腐蝕。玻璃明顯有變薄或者紋路及時更換,。


K-415 尾氣吸收儀:

  • 配置 8%-10% 的氫氧化鈉溶液或者 20% 的碳酸鈉溶液 3L, 堿液中一般加入溴甲酚藍(lán)或溴甲酚綠作為指示劑(取少量固體粉末用乙醇溶解,,再加入堿液中),也可加入酚酞指示劑,。

  • 吸收瓶中要加入固體顆粒的活性炭(顆粒直徑2mm ~ 6mm),,并在兩端加入玻璃棉。

  • 打開電源開關(guān),,確保冷卻水打開,,利用旁通閥可調(diào)節(jié)抽吸性能。需要降低抽吸性能時,,應(yīng)逆時針轉(zhuǎn)動旋鈕,。順時針轉(zhuǎn)動旋鈕將關(guān)閉閥門,,使抽吸性能達(dá)到最大,。

  • 每天實驗前檢查洗滌液是否需要更換,每次更換洗滌液時應(yīng)清潔墊圈,、濾網(wǎng)和密封圈,。檢查活性炭是否出現(xiàn)結(jié)晶,,凝結(jié),,如有需更換。檢查玻璃器件,,軟管及接頭是否有損壞,。


2 凱氏定氮儀使用注意事項

使用凱氏定氮儀是將消化后的樣品(硫酸消化液)加強堿后反應(yīng)并生成 NH4+,,并通過水蒸汽將NH4+ 帶入到硼酸中,,最后用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定,,根據(jù)消耗的標(biāo)準(zhǔn)酸算出N的含量。乘以相應(yīng)的蛋白質(zhì)系數(shù),,即可得到蛋白質(zhì)含量,。


標(biāo)準(zhǔn)測試:

1. 蒸餾量偏低

進(jìn)行蒸餾儀蒸汽力度測試:預(yù)熱設(shè)備后,,空樣品管蒸餾,,蒸餾 5 分鐘,用量筒測量蒸餾液體是否達(dá)到 130mL 以上。


2. 蒸餾儀密封性測試

預(yù)熱設(shè)備,,空白穩(wěn)定后,,用同一方法測試 5 個硫酸銨或磷酸二氫銨樣品,,看樣品回收率及平行性能否達(dá)到要求(回收率 98 - 102 %,RSD < 3),。


3. 設(shè)備冷凝水不足

  • 檢查冷凝水管路連接水閥是否打開,?

  • 檢查進(jìn)水濾網(wǎng)是否堵塞或損壞,?


4. 設(shè)備不排空

  • 檢查廢液管是否插到下水道或廢液桶的液面以下,。

  • 檢查抽吸瓶上下部閥門密封件是否老化或粘連。


凱氏定氮儀日常維護(hù):

1. 清洗和檢查樣品管

每次使用儀器之前執(zhí)行此操作,。清洗干凈后再次用二級純水將樣品管進(jìn)行潤洗一次,,同時檢查樣品管是否有破損情況,如有裂痕及破損,,請停止使用該樣品管,。


2. 清洗玻璃組件

設(shè)置清洗每天結(jié)束時,應(yīng)執(zhí)行清洗程序,,對系統(tǒng)進(jìn)行全面的沖洗,。防噴濺保護(hù)器和冷凝器用水沖洗,去除殘留的氫氧化鈉,。通過定期清洗,,可延長玻璃部件的使用壽命。清洗方法已預(yù)設(shè),,但可根據(jù)樣品管的尺寸進(jìn)行修改和調(diào)節(jié),。針對有樣品管排空的型號如:Multi K-365 及 K-375,我們建議在 300mL 樣品管中添加 200mL 以上的水,,蒸餾設(shè)置 300s 以上。


3. 清洗和維護(hù)軟管和軟管連接

如實驗間隔周期較長,,長時間未使用凱氏定氮儀,,我們建議將所有試劑倒空,,將軟管從試劑桶內(nèi)取出,并手動排空管內(nèi)溶液,,用水進(jìn)行清洗,。尤其是堿液管路,長時間不使用會導(dǎo)致 NaOH 結(jié)晶,,防止對堿泵及管路造成損壞,。


4. 清洗和維護(hù)防濺保護(hù)器

玻璃飛濺保護(hù)器:如果防濺保護(hù)器上部有殘留物,建議將其卸下,,用清洗劑進(jìn)行清洗,。

塑料防濺器:如果您看到空白值不斷增加,建議卸下防濺保護(hù)器,。用清洗劑或超聲水浴進(jìn)行清洗,。當(dāng)拆卸防濺保護(hù)器進(jìn)行清洗時,也要清洗密封件,,以延長其使用壽命,。用清水沖洗后,用軟布擦干,,重新安裝,,并將防濺保護(hù)器裝回原位。


5. 全自動滴定型號的維護(hù)

定期對 pH 電極進(jìn)行校準(zhǔn),,默認(rèn)采用兩點校準(zhǔn),,緩沖液可根據(jù)需要進(jìn)行修改,校準(zhǔn)后看兩個參數(shù),,斜率值和零點,,電極斜率值(Slop)在 95%~103% 之間時,電極可正常使用,,在 96.5%~101% 之間,,電極狀態(tài)很好。


零點(pH(0))在 6.4~8.0 之間時,,電極可正常使用,,越接近7越好。


pH 電極的電極零點和斜率可能因玻璃膜老化或隔膜變化(如污染)而改變,,導(dǎo)致測得的電極斜率小,,由此產(chǎn)生測量值不穩(wěn)定、平衡時間長和結(jié)果不準(zhǔn)確等現(xiàn)象,。以下表格列出了電極斜率小常見的原因和排查措施,。


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3 總結(jié)常見應(yīng)用問題及排查


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