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農(nóng)業(yè)科學的發(fā)展依賴于高效、精準的檢測技術,,以優(yōu)化作物生長環(huán)境,、提高種子質(zhì)量、改良農(nóng)作物品種,。傳統(tǒng)的農(nóng)業(yè)檢測方法,,如光學顯微鏡、石蠟切片,、激光共聚焦顯微鏡等,,往往局限于二維成像,且檢測過程耗時費力,,難以全面呈現(xiàn)作物的內(nèi)部結構,。
顯微CT(Micro-CT)技術作為一種高分辨率、非破壞性的三維成像手段,,在農(nóng)業(yè)研究中展現(xiàn)出巨大的潛力,。該技術利用 X 射線穿透樣品并獲取各個角度的投影數(shù)據(jù),通過計算機重建獲得三維結構信息,,為作物內(nèi)部結構,、種子質(zhì)量檢測、根系研究、害蟲檢測等提供了前所未有的分析能力,。
Chapter.1 為什么農(nóng)業(yè)研究需要顯微CT,?
01 顯微CT的基本原理
顯微 CT 技術的核心是 X 射線斷層掃描成像,它通過以下幾個步驟獲取三維結構信息:
X 射線投射:X 射線穿透樣品并被不同密度的組織吸收,,形成不同的衰減信息,。
多角度掃描:樣品在旋轉(zhuǎn)臺上進行 360° 旋轉(zhuǎn),采集多個角度的投影圖像,。
圖像重建:利用數(shù)學算法(如濾波反投影法,、代數(shù)重建法)將二維投影數(shù)據(jù)計算為三維體數(shù)據(jù)。
三維可視化:生成高分辨率的三維圖像,,可進行體積,、密度、孔隙率等定量分析,。
02 顯微CT的技術優(yōu)勢
相比傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)檢測手段,,顯微 CT 技術具備以下優(yōu)勢:
無損檢測:可在不破壞樣品的前提下獲取內(nèi)部結構信息,避免樣品處理過程中可能產(chǎn)生的誤差,。
高分辨率成像:可達到微米級甚至納米級分辨率,,能夠識別種子胚胎、根系分布等精細結構,。
多層次信息獲?。?/strong>
1.結構信息:植物的莖稈維管束、葉片結構,、果實和種子內(nèi)部結構等
2.密度信息:作物內(nèi)部的密度信息,,用于評估種子質(zhì)量
3.三維模型:有限元分析、3D打印等
Chapter.2 顯微CT在農(nóng)業(yè)研究中的應用
應用一 作物內(nèi)部結構分析
顯微 CT 技術能夠無損地獲取植物內(nèi)部結構的高分辨率三維圖像,,這對于研究植物的莖稈維管束,、葉片結構、果實和種子內(nèi)部結構等具有重要意義,。通過顯微 CT 技術,,研究人員可以詳細觀察植物內(nèi)部結構的微觀特征,從而更好地理解植物的生長,、發(fā)育和適應性,。
? 植物莖稈維管束研究
顯微 CT 技術可以精確地揭示作物莖稈中的維管束分布、形態(tài)和結構特征,,為作物的遺傳解析,、抗倒伏性評估、高通量表型數(shù)據(jù)獲取以及數(shù)據(jù)庫構建等方面提供了強有力的工具,。使用 Neoscan N80 高分辨顯微 CT 以 5μm 像素大小提取玉米維管束網(wǎng)絡,, 獲取三維模型,,模擬水分運輸和力學支撐。
使用 Neoscan N80 高分辨顯微 CT 以 1.5μm 像素大小掃描花藥,,內(nèi)部結構清晰可見。
應用二 種子質(zhì)量檢測與篩選
01 水稻種子堊白率檢測
水稻種子的堊白現(xiàn)象(指胚乳部分出現(xiàn)白色不透明區(qū)域)會影響大米的品質(zhì)及口感,。文獻【1】研究表明,,顯微 CT 可對水稻種子進行三維掃描,計算堊白率和種子顆粒尺寸,,從而提高水稻育種效率,。
圖片源于文獻【1】。稻米堊白的形狀和位置,。白腹(X220),、白核(X226)、白全(香早仙)和白背(X191)堊白精米,;分別具有白腹(b),、白核(c)、白全(d)和白背(e)堊白的精米的橫截面圖像,、重建的3D稻米圖像和重建的3D堊白圖像,。紅色箭頭所示的深色區(qū)域代表稻米堊白的位置。
圖片源于文獻【1】,。利用微型CT三維重建結合Chalkines2.0軟件自動計算堊白率和稻米粒徑,。a在Chalkiness 2.0軟件中導入珍汕97B精米的掃描圖像,對稻米顆粒和堊白度進行自動區(qū)域化,;b自動計算堊白度相關參數(shù),,并將測試報告導出到Excel格式文件中;c基于顯微CT三維重建結合Chalkines 2.0軟件自動計算堊白率的圖形概述,。d重建最大截面附近的20個截面,,并生成平面圖像;e將平面圖像導入Chalkines 2.0進行粒度評估,;f將定量結果導出到Excel文件中,。這些值表示相對長度和寬度。
02 大米內(nèi)部結構分析
使用 Neoscan N80 高分辨顯微 CT 以 1.2μm 像素大小掃描大米,,內(nèi)部胚,、胚芽、胚根,、胚心,、胚乳、盾片,、谷殼等結構清晰可見,。一次掃描多相數(shù)據(jù),,內(nèi)部細節(jié)盡收眼底。
03 玉米種子機械損傷評估
在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和物流運輸過程中,,種子容易受到機械損傷,。顯微 CT 可用于評估機械損傷、昆蟲造成的損傷,、胚異常以及由生物,、非生物制劑引起的種子的其他形態(tài)變化。研究表明,,受到損傷的種子,,其發(fā)芽率和生長質(zhì)量明顯下降【2】。
圖片源于文獻【2】,。通過顯微 CT 掃描玉米種子,,機械損傷的種子產(chǎn)生的幼苗長度比未損傷種子平均短 24%,干物質(zhì)量比未損傷種子低 65%,。研究發(fā)現(xiàn),。胚乳冠狀面受損面積 與 苗長短 和 干物質(zhì)量 直接相關。
使用 NEOSCAN 高分辨率顯微CT 以 8μm 像素大小掃描干燥玉米粒,,可清晰展示玉米種子內(nèi)部子葉,、胚芽、胚軸,、胚根,、 胚乳、種皮結構,,幫助評估種子質(zhì)量,。
04 番茄種子萌發(fā)能力預測
利用顯微 CT 技術可以分析番茄種子的內(nèi)部結構,如胚乳,、胚根及孔隙分布,,可用于預測其發(fā)芽率和生長能力。研究表明,,種子內(nèi)部孔隙率較高(自由空間增加)通常與較低的萌發(fā)率相關【3】,。
圖片源于文獻【3】。圖片展示了如何通過3D形態(tài)學來預測番茄種子的發(fā)芽潛力以及不同發(fā)芽狀態(tài)的種子圖像,。A)嚴重變形的胚胎,,B) 輕微變形的胚胎,C) 嚴重縮小的胚乳,,D) 側(cè)向彎曲的子葉,,即垂直方向 種子橫切面,E)反折子葉,,即種子內(nèi)的一個或兩個子葉急劇反折,,F(xiàn))胚乳中的孔,,G)子葉中的裂縫,N)正常種子結構,。發(fā)芽測試結果示例:正常幼苗,、異常幼苗、死亡種子,、未發(fā)芽種子,。
使用 Neoscan N80 高分辨顯微CT以 1.8μm 像素大小掃描番茄種子表面及內(nèi)部結構,二維和三維結構參數(shù)可測量,,表皮、胚,、胚乳,、內(nèi)部孔隙裂縫的體積分數(shù)可計算并能通過體繪制直觀展示。
應用三 植物根系結構分析:無需洗根,,原位表征
植物根系是植物獲得水分和養(yǎng)分的主要機制,。通過表征根系,人們可以了解植物表型,,以幫助培育具有更有效水分和養(yǎng)分捕獲的植物,。傳統(tǒng)的根系表征可能很繁瑣,包括需要從土壤中挖取植物,,并清洗根系,。而顯微 CT 技術來表征根系結構,無需進行清洗,,可以進行原位表征根系結構,。
使用 Neoscan N80 高分辨顯微 CT 以 20μm 像素大小掃描水稻根系,分析根系的分布,、直徑,、分叉結構及體積密度,幫助育種專家篩選高效吸水和耐旱品種,。
圖片源于文獻【4】,。(A) 番茄根木質(zhì)部結構(紅色)的形態(tài);可能會發(fā)生嚴重的栓塞,,影響水的運輸,。(B) 番茄葉柄中脈管系統(tǒng)的細胞結構影響水分和葉子的同化通量。(C) 葉子結構決定 CO2 和 H2O 的運輸,。(D) 番茄種子結構影響種子萌發(fā),。(E) 番茄細胞和細胞間隙的形狀和大小影響成熟過程中的呼吸氣體交換。對于每個圖 (A–E),,給出了原始 X 射線顯微 CT 橫截面以及渲染的 3D 圖像,。
應用四 病蟲害防治
顯微 CT 技術可以幫助研究人員在不破壞樣品的情況下,,用于檢測儲糧害蟲、果實內(nèi)部害蟲及植株內(nèi)寄生蟲的生長情況,,幫助制定精準防治措施,。
咖啡果小蠹是一種影響咖啡豆質(zhì)量的害蟲,使用 Neoscan N80 高分辨顯微 CT 以 980 nm像素大小掃描,,可無損成像其生長位置,、取食模式及侵害程度,為咖啡種植業(yè)提供有效的蟲害管理方案,。
Chapter.3 總結與展望
顯微 CT 技術作為一種先進的三維成像技術,,在農(nóng)業(yè)領域的應用前景廣闊。它為農(nóng)業(yè)生產(chǎn),、作物改良和植物科學研究提供了一種新的視角和方法,。隨著技術的不斷發(fā)展和完善,顯微 CT 技術將在農(nóng)業(yè)領域發(fā)揮越來越重要的作用,。
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