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單細胞測序技術起始核酸材料極少,，步驟比普通NGS繁雜,，實驗周期更長，難度和風險也更大,。重現(xiàn)性和成功率是一大考驗,。單細胞測序方法眾多，除了商品化試劑盒,，許多研究人員也會針對自己關注的特征開發(fā)全新的技術,。另一方面，開展腫瘤異質(zhì)性等針對細胞群體的研究越來越普遍,，這需要對大批量細胞進行逐一的測序和解析,。如果按照試劑盒常量/rxn，手工完成每一個細胞的實驗,，勞力和成本都難以承受,。

Echo硬核的聲波移液技術技術，通過能量控制準確的納升級液體轉(zhuǎn)移,，噴射液滴單位可以低至2.5 nL。其非物理接觸,、準確小量移液,、高速度的特征，決定了Echo非常適合解決單細胞測序中遇到的超高通量,、技術靈活多變,、反應scale-down成本控制、交叉污染等問題,。

非物理接觸

     ·  樣本完整性

     ·  無吸頭消耗

     ·  降低交叉污染風險

移液的靈活性

     ·  2.5 /25 nL 每滴

     ·  200-500 滴/秒

     ·  任意孔至任意孔移液

移液條件溫和

     ·  DNA/RNA/蛋白等生物大分子

以結(jié)合SMART-Seq cDNA文庫制備及Nextera XT 測序文庫制備的單細胞RNA-seq實驗為例,。SMART-Seq反應體系（50 uL）可以由Echo縮小4，5,，8,，10,，16，20至32倍,，Nextera XT 試劑盒可縮小10倍（50 uL至5 ul）使用,。值得注意的是，SMART-seq cDNA文庫制備中,，常量反應總體積為50 ul, 縮小32倍后反應總體積僅僅只有1.75 uL,，還不及一個常量反應中逆轉(zhuǎn)錄酶使用量大。借助Echo,，一個96 rxn的試劑盒將具備完成3072 rxn的可能,。

Echo可以完成

● 微量化的單細胞基因組放大3

● 微量化的單細胞測序文庫制備

● 微量化的文庫濃度質(zhì)控

● 一步法文庫Normalization&Pooling

● Better together—— Echo plus Biomek自動化單細胞測序方案

基于Echo的單細胞文庫制備不受待測細胞數(shù)目的限制，支持各種試

Better together—— Echo plus Biomek自動化單細胞測序方案

基于Echo的單細胞文庫制備不受待測細胞數(shù)目的限制,，支持各種試劑盒的靈活組合和NGS建庫方法學DIY,。做你想做的，測你想測的,，提供scale-down的微量化反應體系和scale-up的自由度,。

將Echo聲波移液工作站與Biomek i-系列自動化工作站結(jié)合，可實現(xiàn)更高自動化程度的單細胞測序?qū)嶒?。Echo完成文庫制備中涉及的微量化反應體系構(gòu)建,， 由Biomek自動化工作站配合實現(xiàn)文庫 Agencourt SPRIselect磁珠PCR clean-up和片段篩選。實驗流中產(chǎn)生的數(shù)據(jù)均可查可溯,，保證文庫信息安全可靠,。

參考：

        1. US Patent 6938987

        2. US Patent 6938995

        3.