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UVD-680-1紫外檢測(cè)儀
UVD-680-1紫外檢測(cè)儀

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上海

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上海金達(dá)生化儀器有限公司

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儀器簡(jiǎn)介:

應(yīng)用范圍:

高性能雙光束紫外檢測(cè)儀,適用于生物化學(xué),、合成化學(xué),、天然產(chǎn)物、藥物開發(fā),、食品化學(xué),、農(nóng)業(yè)化學(xué)、化妝品,、聚合物與石化等行業(yè)的科研與制備,。可進(jìn)行離子交換層析,、親和層析 凝膠過濾層析,、疏水作用層析等方法,用于 蛋白質(zhì),、酶,、核酸、核苷酸,、多肽、(含/不含芳香族氨基酸)及其它任何有紫外吸收的生物/非生物樣品的分離分析,、流動(dòng)檢測(cè),,是生物分子純化的理想選擇。

主要特點(diǎn):

我公司生產(chǎn)的高性能雙光束核酸蛋白紫外檢測(cè)儀與市場(chǎng)上單光束核酸蛋白紫外檢測(cè)儀比較:

一,、光源不同,、單色性精度達(dá)99。9%

二,、光路不同,,穩(wěn)定性時(shí)間小于20 分鐘內(nèi)。

三、價(jià)格一樣,,性價(jià)比高

核酸與蛋白測(cè)試原理

蛋白質(zhì)分子中含有共軛雙鍵的酪氨酸,、色氨酸等芳香族氨基酸。它們具有吸收紫外光的性質(zhì),,其吸收高峰在280nm波長(zhǎng)處,,且在此波長(zhǎng)內(nèi)吸收峰的光密度值與其濃度成正比關(guān)系,故可作為蛋白質(zhì)定性,、定量測(cè)定的依據(jù),,正因?yàn)槿绱耍?80nm處的紫外吸收法通常被用于層析系統(tǒng)中蛋白質(zhì)濃度的連續(xù)監(jiān)控。但由于各種蛋白質(zhì)的酪氨酸和色氨酸的含量不同,,故要準(zhǔn)確定量,,必需要有待測(cè)蛋白質(zhì)的純品作為標(biāo)準(zhǔn)來比較,或且已經(jīng)知道其消光系數(shù)作為參考,。另外,,不少非蛋白物質(zhì)在280nm波長(zhǎng)下也有—定吸收能力,可能發(fā)生干擾,。其中尤以核酸(嘌呤和嘧啶堿)的影響更為嚴(yán)重,。在280nm處的吸收比蛋白質(zhì)強(qiáng)10倍(每克),但核酸在254nm處的吸收更強(qiáng),,其吸收高峰在254nm附近,。核酸254nm處的消光系數(shù)是280nm處的2倍,而蛋白質(zhì)則相反,,280nm紫外吸收值大于254nm的吸收值,。通常:

純蛋白質(zhì)的光吸收比值:A280/A254 >> 1.8

純核酸的光吸收比值: A280/A254 << 0.5

因此蛋白質(zhì)溶液中同時(shí)存在核酸時(shí)(生物體系大多數(shù)如此),必須同時(shí)測(cè)定OD254nm,,與OD280nm,。然后根據(jù)兩種波長(zhǎng)的吸收度的比值,通過經(jīng)驗(yàn)公式校正,,以消除核酸的影響而推算出蛋白質(zhì)的真實(shí)含量,。

蛋白質(zhì)濃度=1.45×A280-0.74×A254 (mg/ml)

此經(jīng)驗(yàn)公式是通過一系列已知不同濃度比例的蛋白質(zhì)(酵母烯醇化酶)和核酸(酵母核酸)的混合液所測(cè)定的數(shù)據(jù)來建立的。

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