研究結合動力學與片段篩選分析的高性能平臺

Pioneer與 Pioneer FE系統(tǒng)應用獨特的單次進樣模式,， 僅需幾分鐘便可提供高質量的動力學 ( ka,， Kd）和親和力 ( KD ) 數(shù)據(jù)。系統(tǒng)應用表面等離子共振 ( SPR) 技術,， 可對小分子片段到生物制劑等各種生物分子的相互作用進行超高靈敏度的 快速 表征,。Pioneer系統(tǒng)在化合物初級篩選階段即可直接快速獲取親和力數(shù)據(jù)(KD)， 顯著降低篩選時間和成本,，迅速找到理想的先導化合物候選物,。

Pioneer平臺助力決策先行

應用OneStep® 梯度進樣模式 ， 在樣品初級篩選階段即可獲得可靠的 親和力 (KD) 和動力學(Ka,， Kd)數(shù)據(jù)

在24小時內(nèi),， 通過單次實驗完成 768個小分子片段的動力學篩選 。

在29 個小時內(nèi),， 獲取64 個樣品完整詳盡的高質量動力學表征數(shù)據(jù) ,。

極低的基線噪音與基線漂移確保系統(tǒng)高靈敏度表現(xiàn) ， 輕松應對超高親和力樣品,。

依據(jù)Scrubber 和Clamp 架構設計的數(shù)據(jù)分析軟件 ,， 結果可靠， 廣獲業(yè)界認可,。

全自動化設計,， 實現(xiàn)72 小時無人值守運行

片段篩選的新金標準

片段篩選面臨諸多技術挑戰(zhàn)

樣品數(shù)量巨大

分析物分子量較低 (<300 Da)

結合親和力低(KD : 10 μ M 至 10 mM)

受溶解度限制 ， 無法用高濃度樣品 (>KD )測試結合

結合解離曲線為快上快下模式且信號很低,，無法做出準確判定

Pioneer FE系統(tǒng)的OneStep進樣方法將有效改 變基千片段的藥物發(fā)現(xiàn)

(fragment-based drug discovery,， FBDD) 檢測模式：

提升通量,， 24小時完成 768個樣品檢測

在初級篩選過程中直接得到動力學數(shù)據(jù)，省去次級篩選

連續(xù)濃度梯度的進樣方式可獲得更多數(shù)據(jù)內(nèi)容

樣品單次進樣模式可大幅減少樣品用量及制備時間

快捷的數(shù)據(jù)分析

對由SPR獲得的 片段篩選數(shù)據(jù)進行分析通常非常繁瑣 ,， 分析單塊微孔板的篩選數(shù)據(jù)往往需就要好幾天,。Qdat分析軟件使用統(tǒng)一的方法從候選物庫中選擇活性物，并允許對于不同日期或儀器中采集的篩選數(shù)據(jù)進行歸一化處理,， 因此可以比較整個篩選活動,。這種集成導致后處理時間的顯著減少。該軟件提供多種模型用于擬合相互作用數(shù)據(jù) ,， 包括動力學,， 質量遷移校正和多位點結合模型。初級篩選的數(shù)據(jù)可直接用千親和力KD分析,， 而不必運行耗時費力的次級篩選 ,。

片段篩選中的競爭檢測

競爭檢測在藥物發(fā)現(xiàn)中非常有用?？赏ㄟ^對照分子和陽性片段的競爭,， 直接找到目標活性位點的結合物。與OneStep模式一樣,，NeXtStep進樣模式能夠在單次進樣中進行完整的動力學分析。當競爭分子存在的情況下,，不同位點特異性競爭能夠被清楚地進行不同結合能力的檢測 ,。

蛋白－小分子相互作用

蛋白質和小分子之間的相互作用已成 為學術研究 和藥物研發(fā)的核心。Pioneer 系統(tǒng)將優(yōu)異的靈敏度與新穎的 表面化學**結合,，完全滿足對低至70Da的小分子進行動 力學測定,。該級別的定量分析數(shù)據(jù)有助千研究人員獲取更多新藥候選物的相關信息。

Pioneer系統(tǒng)參數(shù)

折光率范圍1.33- 1.40

短期基線噪音 < 0. 1RU

長期基線漂移 < 0.3RU /min

檢測分子量下限 < 70 Da

檢測范圍 ka 10 ² -10⁸ M·' s·'

kd10 ^-6 - 0.1 s^-1

K D 1 0^-3 - 10 ^-12 M

樣品載量 2 樣品規(guī)格 96孔板（普通／深孔/PCR),， 384 孔板

樣品溫控 4 至 40攝氏度 (小于室溫15攝氏度 )

樣品進樣 全自動

通道數(shù) 3

流路 1,， 1- 2， 1- 2- 3,， 3,， 3- 2， 3-2-1

流路體積 < 90 nl

通道死體積 < 20 nl

實時扣減參比曲線 是

進樣體積 2- 700 μL

進樣反應時間 < 0.75 second @ 25 μL/min

同時進樣 可以,，可支持兩個樣品同時進樣

梯度進樣 是

流速 0.1- 150 μL/ min

緩沖液在線脫氣 是

系統(tǒng)溫控 4 至 40°C (小于室溫15°)

數(shù)據(jù)采集頻率 1-20Hz

自動化能力 >72 小時無人值守運行

傳感器種類

基于氨基偶聯(lián) COOHl ,， COOH2， COOH5 ,， COOHV

基于Avidin-Biotin偶聯(lián) AvCap and BioCap

親和捕獲組氨酸標簽蛋白 HisCap

用于囊泡捕獲 VesCap