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LSM是世界上**臺真正意義上的高通量全自動斑馬魚顯微操作注射儀,，它的誕生完全可以滿足對于高通量胚胎或細(xì)胞的注射需求和解放實驗操作人員的雙手,，讓顯微注射變得更加簡單，快速,，精準(zhǔn),！

高通量全自動斑馬魚胚胎顯微注射與傳統(tǒng)技術(shù)相比優(yōu)勢：

1. 高通量，2500個胚胎/小時,，全自動無需手工注射

2. 可定量的注射,，重復(fù)性高，方便對比研究

3. 快速檢測通常需要3 - 7天,，而不是使用其他技術(shù)的數(shù)周時間

4. 精確全自動3D定位,，方便快速，可以實現(xiàn)高效的自動成像（兼容共聚焦顯微鏡等）

5. 可培養(yǎng)細(xì)胞3D球狀,，使用細(xì)胞系或原細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)

6. 可進(jìn)行腫瘤微環(huán)境研究;球狀體可以在預(yù)先形成的微晶中引入環(huán)境,，如與膠原凝膠混合的細(xì)胞

7. 可細(xì)胞間相互作用的研究，如癌癥和免疫細(xì)胞,，細(xì)菌和免疫細(xì)胞

斑馬魚胚胎顯微注射應(yīng)用領(lǐng)域：

1. 高通量斑馬魚胚胎注射：將瓊脂糖凝膠注入模具形成一個瓊脂網(wǎng)格,，該網(wǎng)格用于將斑馬魚的胚胎對齊。注射時,，根據(jù)實驗所需樣品批量不同,，可以選擇不同規(guī)格的網(wǎng)格，如: 2580 個,， 1024 個,， 9 x 100 個。 將胚胎放入模具中只需要不到5分鐘的時間,。我們的機器可以在*接近受精卵和卵黃表面處進(jìn)行注射,，從而保證了注射的質(zhì)量,。

2. 3D細(xì)胞培養(yǎng)，細(xì)胞球類：首先,，膠原蛋白,，或另一種水凝膠，被吸進(jìn)一個多孔板,，并被允許設(shè)置,。然后，從細(xì)胞培養(yǎng)或初級組織中制備出一種單細(xì)胞懸浮體,。這種細(xì)胞懸浮體與一種惰性聚合物,，PVP混合在一起，并被裝入針頭,。*后,，細(xì)胞懸浮在預(yù)先確定的位置被注入到水凝膠中。一種典型的檢測方法是培養(yǎng)3-7天,，可以使用標(biāo)準(zhǔn)/共焦顯微鏡進(jìn)行病理處理,，或為流式細(xì)胞多色分析制樣?？蓮?fù)制的注入位置允許對相同的位置的所有孔進(jìn)行成像,。球體的大小(~300μ，~10k的細(xì)胞）和外生長是可復(fù)制的,，從而成為活性篩查遷移,、增殖等的立項選擇。

3. 細(xì)胞注射：注射是在精確的位置進(jìn)行的,，因此不同的細(xì)胞類型可以被注射到可復(fù)制的距離上,。這些注射可以在不同的時間進(jìn)行，以適應(yīng)不同的生長速度或時間依賴的生物相互作用,。許多混合培養(yǎng)分析正在發(fā)展中,。

斑馬魚胚胎顯微注射文獻(xiàn)鏈接：

1. Spaink， H. P.,， et al. Robotic injection of zebrafish embryos for high-throughput screening in disease models. Methods. 62,， 246-254

2. Veneman， W. J.,， et al. A zebrafish high throughput screening system used for Staphylococcus epidermidis infection marker discovery. BMC Genomics. 14,， 255

3. Meijer， A. H.,， Spaink， H. P. Host-pathogen interactions made transparent with the zebrafish model.Curr Drug Targets. 12,， 1000-1017

4. Pardo-Martin,， C.,， et al. High-throughput in vivo vertebrate screening. Nature Methods. 7， 634-636

5. Stoop,， E. J. M.,， et al. Zebrafish embryo screen for mycobacterial genes involved in the initiation of granuloma formation reveals a newly identified ESX-1 component. Disease Model.， & Mechanisms. 4,， 526-536

6. Benard,， E. L.， et al. Infection of zebrafish embryos with intracellular bacterial pathogens. J Vis Exp.