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如何將 TLC 條件
成功轉(zhuǎn)化到 Flash 色譜上
色譜應(yīng)用
在進(jìn)行全面的 Flash 色譜之前,，化學(xué)家通常會(huì)進(jìn)行薄層色譜(TLC)篩選,。除了節(jié)省時(shí)間,、溶劑和樣品外,，用戶還可以使用他們的 TLC 數(shù)據(jù)為接下來(lái)的 Flash 色譜運(yùn)行找到更合適的參數(shù),。這篇文章強(qiáng)調(diào)了 TLC 結(jié)果如何轉(zhuǎn)化為優(yōu)化分離的理論,，并展示了軟件如何將 TLC 數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為更好的純化條件,。
假如平時(shí)愛(ài)好騎平衡車的你突然某一天想去嘗試自己從未涉獵的自行車時(shí)，并且很輕而易舉的就掌握了騎自行車的技巧,，請(qǐng)你不要驚訝,。這是因?yàn)槟阍O(shè)法將平衡技能從簡(jiǎn)單的無(wú)踏板自行車轉(zhuǎn)移到復(fù)雜的自行車上。
有趣的是,，我們實(shí)驗(yàn)室里的科學(xué)家也有類似的功能,。我們通常從更簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)和方法開(kāi)始，這些實(shí)驗(yàn)和方法需要更少的資源,，然后再轉(zhuǎn)移我們的知識(shí)并嘗試更復(fù)雜的技術(shù),。以薄層色譜（TLC）和 Flash 色譜為例。由于簡(jiǎn)單,、快速和樣品使用量少,，許多 Flash 用戶更喜歡在純化前對(duì)樣品進(jìn)行 TLC 篩選。就像從平衡車到腳踏自行車一樣,，人們可以使用從 TLC 實(shí)驗(yàn)中獲得的信息進(jìn)行更具挑戰(zhàn)性的Flash色譜分析,。
如何在自動(dòng)化 Flash 色譜儀將 TLC 上的結(jié)果轉(zhuǎn)化成為有用的方法？
首先我們需要理解從 TLC 色譜上獲得的數(shù)據(jù)與待分離 Flash 色譜柱體積（CV）之間的關(guān)系,。一個(gè)典型的 TLC 色譜分析如下：
▲ TLC 色譜示例,，其中(a)表示溶劑前沿移動(dòng)的距離，(b)表示分析物移動(dòng)的距離
跑完 TLC 薄層色譜之后，需要計(jì)算每個(gè)分析物的保留因子（Rf）,，這個(gè)可以用一個(gè)簡(jiǎn)單的公式表示：
保留因子（Rf）=分析物到原點(diǎn)的距離（b）/溶劑前沿到原點(diǎn)的距離（a）
其中：
Rf =1 表示在 TLC 上沒(méi)有保留(隨著溶劑前移),，
Rf =0 表示對(duì)溶劑沒(méi)有親和力(停留在起跑線上)。
使用薄層色譜開(kāi)發(fā)的方法可轉(zhuǎn)移到 Flash 色譜,，因?yàn)楸Ａ粝禂?shù)和柱體積之間的關(guān)系如下:
在實(shí)際應(yīng)用中,，保留系數(shù)與柱體積的反比關(guān)系如下:
最佳 Rf 值范圍為 0.15 ~ 0.35,CV 值范圍為 2.8 ~ 6.7。
較小的 Rf 值導(dǎo)致很長(zhǎng)的運(yùn)行時(shí)間和高溶劑消耗,，而較大的 Rf 值導(dǎo)致較短的運(yùn)行時(shí)間,，并有未完全分離的風(fēng)險(xiǎn)，如下圖所示,。
▲ 不同 Rf 和 CV 值下的 TLC 色譜和 Flash 色譜儀示例,。(a)較小的 CV 值導(dǎo)致較短的運(yùn)行時(shí)間，這可能導(dǎo)致分離度不夠,。(b) CV 范圍在 2.8 和 6.7 之間的結(jié)果是分辨率和運(yùn)行時(shí)間以及溶劑消耗之間的最佳平衡,。(c)較大的 CV 值導(dǎo)致運(yùn)行時(shí)間長(zhǎng)，溶劑消耗高,。
這些理論考慮可以很容易地應(yīng)用于特定的方法開(kāi)發(fā)軟件,，例如 Navigator。該程序可以將 TLC 數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為優(yōu)化的 Flash 方法,，以獲得最佳的分離和純化,。
用戶只需要幾個(gè)簡(jiǎn)單的步驟將他們的 TLC 結(jié)果轉(zhuǎn)移到軟件中，并為他們的 Flash 色譜過(guò)程確定最合適的參數(shù),。
首先,，將 TLC 保留因子數(shù)據(jù)和色譜柱信息輸入軟件中，輸入使用的溶劑和 Rf 值,，然后選擇色譜柱類型和相應(yīng)的流速,。
其次，單擊“計(jì)算”按鈕并接受,，系統(tǒng)自動(dòng)將分離參數(shù)呈現(xiàn)在待操作界面,。
最后，根據(jù)轉(zhuǎn)化條件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)并得到想要結(jié)果,。
需要注意的是,，在 TLC 板上使用不同的硅膠與在所選色譜柱上使用不同的硅膠可能會(huì)由于硅膠的選擇性不同而產(chǎn)生不同的結(jié)果。
理想情況下,，TLC 板和色譜柱應(yīng)選擇相同類型的 Silica,。
考慮到這些注意事項(xiàng)和軟件應(yīng)用，輕松傳輸 TLC 數(shù)據(jù)將幫助您獲得目標(biāo)化合物的最佳分離效果,。
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