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【瑞士步琦】【應(yīng)用】從貓爪草提取物當(dāng)中有效分離紫外吸收與非紫外吸收成分

步琦 2024-01-29 | 閱讀：718

從貓爪草提取物中

分離紫外吸收與非紫外吸收成分

Pure 應(yīng)用

貓爪草是一種熱帶藤本植物,，是科學(xué)研究的一種寶貴的藥物資源,?；钚猿煞譃樯飰A，丹丁酸和其它可能有促進(jìn)免疫系統(tǒng)功能潛力的植物素,。其中,，生物堿有降壓藥的效果，可降低膽固醇,，除此之外,，還具有消炎、抗氧化和抗癌等特性,。

方法

萃取條件
萃取類(lèi)型		研磨
重量		2g
萃取溶劑		乙醚
溶劑體積		20ml
超聲波提取		30min

Flash 色譜條件
FlashPure EcoFlex 12g Sclia
流速		25ml/min
UV1 波長(zhǎng)		254nm
UV2 波長(zhǎng)		280nm
溶劑 A		正己烷
溶劑 B		乙酸乙酯
進(jìn)樣模式		液體
ELSD 載體		空氣
柱平衡時(shí)間		5min

洗脫方法
步驟	1	2	3	4
時(shí)間（min）	0.0	3.0	3.0	4.0
%B	30	30	100	100

▲ 圖 1. 在裝有 12g Sclia 填料的 FlashPure EcoFlex 柱上對(duì)貓爪草進(jìn)行純化,。色譜圖說(shuō)明使用紫外檢測(cè)器和蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)峰的諸多優(yōu)點(diǎn)。

通過(guò)調(diào)整流動(dòng)相的梯度對(duì)方法進(jìn)行優(yōu)化以期獲得更好的分離效果,，方法如下：

洗脫方法
步驟	1	2	3	4
時(shí)間（min）	0.0	3.0	9.0	1.0
%B	30	30	100	100

▲ 圖 2. 優(yōu)化后的方法使得整體分離度大大提高,，在 ELSD 檢測(cè)器的加持下,，可以有效檢測(cè)到無(wú)紫外吸收的目標(biāo)產(chǎn)物,。

使用分析型 HPLC 將兩組實(shí)驗(yàn)與初始粗提物進(jìn)行分析對(duì)照，結(jié)果如下：

▲ 圖 3. 通過(guò)對(duì)照發(fā)現(xiàn)只用 UV 檢測(cè)器對(duì)樣品進(jìn)行純化,，不能檢測(cè)非發(fā)色團(tuán)的產(chǎn)物,，導(dǎo)致餾分純度不高。使用 ELSD 檢測(cè)器收集的餾分可分離出高回收率和高純度的組分,。

結(jié)論

天然產(chǎn)物在新藥物研發(fā)中發(fā)揮重要的作用,。粗提物通常含有活性良好的先導(dǎo)化合物，因此分離和純化時(shí)需要很多步驟且充滿(mǎn)未知性,。Pure 系統(tǒng)收集包括 UV 檢測(cè)器和 ELSD 檢測(cè)器在內(nèi)的多個(gè)檢測(cè)器的信號(hào),，克服了使用傳統(tǒng) Flash 色譜方法遇到的純化瓶頸，大大提高目標(biāo)產(chǎn)物的純度和回收率,?；瘜W(xué)家可以在雙檢測(cè)器以及 Navigator 技術(shù)的幫助下，有效地從粗提取物中分離目標(biāo)化合物和含量低的成分,，節(jié)省時(shí)間和人力成本,。

參考

Cat's Claw; Technical Literature, Raintree Nutrition, Carson City, Nevada.
Medicinal natural products; a biosynthetic approach, 3rd edition; Dewick, P.; John Wiley & Sons, Inc., Hoboken, New Jersey, 2009.