日韩av在线高清免费毛片日韩欧美一级成人|女人18以后毛片|国产18女人毛多水多毛片|乱系列人妻视频|中文字幕久久熟女人妻av|91麻豆人妻|校花被我玩弄|父女乱荡|高潮videossex潮喷另类|日本在线观看人妻,黑人侵犯日本人妻,色哟哟视频线在线播放欧美,亚洲欧美国产国产一区第二页

手機(jī)版

掃一掃,,手機(jī)訪問(wèn)

關(guān)于我們 加入收藏
400-810-0069轉(zhuǎn)3366

中國(guó)粉體網(wǎng)認(rèn)證電話,請(qǐng)放心撥打

步琦實(shí)驗(yàn)室設(shè)備貿(mào)易(上海)有限公司

4 年白金會(huì)員

已認(rèn)證

撥打電話
獲取底價(jià)
提交后,,商家將派代表為您專人服務(wù)
立即發(fā)送
點(diǎn)擊提交代表您同意 《用戶服務(wù)協(xié)議》
當(dāng)前位置:
步琦 >公司動(dòng)態(tài) >

【應(yīng)用】通過(guò)SFC-UV/MS分離西紅花主要提取物

【應(yīng)用】通過(guò)SFC-UV/MS分離西紅花主要提取物
步琦  2023-07-12  |  閱讀:593

通過(guò) SFC-UV/MS 分離西紅花主要提取物  


西紅花,,又稱藏紅花,是世界上最昂貴的香料之一,,其花朵呈現(xiàn)一種精致的紫色色調(diào),,內(nèi)部的絲狀紅色柱頭非常珍貴。在秋天,,紅色柱頭通過(guò)手工采摘并分離,,生產(chǎn)一磅(0.45公斤)的西紅花柱頭需要7萬(wàn)朵花。這些紅色柱頭可以用作香料,、染料并且具有藥用價(jià)值。


西紅花內(nèi)有非常多的提取物,,主要成分為西紅花苷,、苦番紅花素、西紅花酸等,。其中許多化合物有公認(rèn)的藥理活性,, 比如西紅花苷在治療心血管疾病方面具有一定的作用。


西紅花苷存在于西紅花及梔子屬植物中,,比較常見(jiàn)的分離法是采用高壓液相色譜法(HPLC),,C-18色譜柱,流動(dòng)相為水/乙腈或水/甲醇體系,。初始梯度為高含水量,,有機(jī)溶劑含量隨時(shí)間而增加,以洗脫非極性化合物,,分離過(guò)程中也會(huì)加入甲酸以改善峰型,。[2-6]


梔子類藥材中西紅花苷類成分的定性定量分析:

image.png

▲ 圖2:A.混合對(duì)照品,;B.梔子;C.水梔子的 HPLC 分離圖


西紅花苷Ⅰ 5. 西紅花苷Ⅱ 8. 西紅花苷Ⅳ 17. 西紅花苷Ⅲ


Acchrom XCharge C18 色譜柱(4.6 mm×250 mm,,5μm),;流動(dòng)相為乙腈(A)和0.1%甲酸水溶液(B),梯度洗脫,,洗脫程序?yàn)椋?~15min,,22% A;15~30min,,22%~25% A,;30~35min,25%~28% A,;35~50min,,28% A;50~72min,,28%~45% A,;72~85min,45%~55% A,;流速1mL·min-1,,柱溫30℃,檢測(cè)波長(zhǎng)440 nm,,進(jìn)樣體積10μL,。


本文介紹了一種利用BUCHI Sepiatec SFC-50分離西紅花柱頭主要提取物的方法。SFC-50內(nèi)置紫外檢測(cè)器并與MS(質(zhì)譜檢測(cè)器)相連,,從而判斷峰物質(zhì),。

image.png

▲ 圖3:Sepiatec SFC-UV/MS系統(tǒng)


1實(shí)驗(yàn)條件

image.png

2結(jié)果與討論

image.png

▲ 圖4:西紅花提取物在紫外波長(zhǎng)440nm下的分離圖


用甲醇對(duì)西紅花柱頭的主要成分進(jìn)行了提取后,得到的多數(shù)為極性化合物,。圖4為紫外波長(zhǎng) 440nm 下的分離圖,。在前18分鐘,由于流動(dòng)相為弱極性(86- 82% CO2),,紫外檢測(cè)器下無(wú)化合物被洗脫下來(lái),。當(dāng)流動(dòng)相的極性通過(guò)梯度增加時(shí),幾種極性化合物被依次洗脫,。其中的主要提取物西紅花酸易與幾種糖(葡萄糖,、龍膽二糖和三氯蔗糖)結(jié)合形成西紅花苷。因?yàn)槲骷t花酸與糖分子的共價(jià)鍵導(dǎo)致極性的強(qiáng)烈增加,,并使西紅花苷具有親水性,,所以在氨基柱上的分離出峰時(shí)間比較晚[7-9]。


在質(zhì)譜檢測(cè)上,我們使用電噴霧離子源(ESI),,這是一種常壓下的溫和電離方法,,可以在正離子(ESI+)或負(fù)離子(ESI-)下進(jìn)行。在正離子模式下,,通常會(huì)形成鈉加合物([M+Na]+)或質(zhì)子加合物([M+H]+),。在負(fù)離子模式下,([M-H]-)離子通常是由于失去一個(gè)質(zhì)子而形成的,。根據(jù)樣品及其性質(zhì)的不同,,也可以形成多種帶電產(chǎn)物。


image.png

▲ 圖5:(a) UV-440 nm;(b) mass 999-999.5 (ESI+);(c) mass 836.9-837.4 (ESI+);(d) mass 674.8-675.3 (ESI+);(e) mass 975.5- 976 (ESI-);(f) mass 813.4-813.9 (ESI-);(g) mass 651.4-651.9 (ESI-);(h) mass 341.2-341.7 (ESI-)

6-1.png

▲ 圖6:西紅花苷Ⅰ(a) ESI+ and (b) ESI-, 西紅花苷Ⅱ(c) ESI+ and (d) ESI-, 西紅花苷Ⅲ (e) ESI+ and (f) ESI- 以及西紅花酸單甲酯(g)ESI-的質(zhì)譜圖


圖5與圖6展示了西紅花甲醇提取物通過(guò) Sepiatec SFC-50 結(jié)合 MS 檢測(cè)器后的分離圖譜,,信號(hào)基于不同的 m/z(質(zhì)子數(shù)/電荷數(shù)),。根據(jù)質(zhì)譜結(jié)果我們可以推斷出表1的結(jié)構(gòu)式結(jié)果。


image.png

▲ 表1:根據(jù)圖5推斷的西紅花主要提取物的結(jié)構(gòu)式和摩爾m/z


西紅花苷Ⅰ是由西紅花酸和兩個(gè)龍膽二糖分子組成,。在圖5中,,該化合物 ESI+ 模式下的檢測(cè) m/z 為 999-999.5,其加合物由鈉(m/z 23 g/mol)和樣品分子(m/z 976.4 g/mol)組成,。在 ESI- 模式下也可以檢測(cè)到西紅花苷Ⅰm/z 為975.5-976,。其對(duì)應(yīng)的圖6質(zhì)譜圖為(a)與(b)。


西紅花苷Ⅱ由西紅花酸,、葡萄糖和龍膽二糖分子組成,。在 ESI+ 模式(圖5(c))和 ESI- 模式(圖5(f))下,分別為(m/z 836.9-837.4[M+Na]+)和(m/z 813.4-813.9[M- H]-),。其對(duì)應(yīng)的圖6質(zhì)譜圖為(c)與(d),。


西紅花苷Ⅲ在 ESI+ 模式(圖5(d))和 ESI- 模式(圖5(g))下,分別為(m/z 674.8-675.3[M+Na]+)和(m/z 651.4-651.9[M-H]-),。其對(duì)應(yīng)的圖6質(zhì)譜圖為(e)與(f),。


西紅花酸單甲酯只能在 ESI- 模式(圖5(h))下鑒別,m/z為341.2-341.7[M-H]-,。其對(duì)應(yīng)的圖6質(zhì)譜圖為(g),。


在 ESI 過(guò)程中,樣品分子會(huì)被碎片化,,特別是在 ESI- 模式中。例如,,西紅花苷Ⅰ和西紅花苷Ⅱ上的葡萄糖基團(tuán)在ESI-模式下的脫離,,導(dǎo)致其在圖5(g) m/z 651.4-651.9[M-H]- 中也被鑒定出來(lái)。


3結(jié)論


Sepiatec SFC-50 可以有效分離西紅花柱頭內(nèi)結(jié)構(gòu)相似的提取物,,為了鑒別里面的未知成分,,采用 SFC-UV/MS 結(jié)合的形式,適用于多數(shù)天然產(chǎn)物應(yīng)用。相比 HPLC 的流動(dòng)相,,超臨界二氧化碳具有高擴(kuò)散系數(shù)和低粘度的特點(diǎn),,并且得益于二氧化碳的弱酸性,無(wú)需加入甲酸也能獲得不錯(cuò)的峰型,。在選擇性上,,由于 SFC 屬于正相色譜,在出峰順序和時(shí)間上與傳統(tǒng)的 RP-LC 完全不同,,這使得 SFC 在分離一些化合物組分時(shí)具備出峰時(shí)間上的優(yōu)勢(shì),。比如本次分離中的西紅花苷Ⅲ,在圖2的 RP-LC 中,,出峰順序靠后,,時(shí)間在 60 分鐘之后;而在圖5的 SFC 中,,其出峰順序靠前,,時(shí)間在 28-29 分鐘。這在分離一些極性偏弱的化合物時(shí)可以節(jié)省很多時(shí)間,。


image.png

虛擬號(hào)將在 秒后失效

使用微信掃碼撥號(hào)

為了保證隱私安全,,平臺(tái)已啟用虛擬電話,,請(qǐng)放心撥打(暫不支持短信)
留言咨詢
(我們會(huì)第一時(shí)間聯(lián)系您)
關(guān)閉
留言類型:
     
*姓名:
*電話:
*單位:
Email:
*留言內(nèi)容:
(請(qǐng)留下您的聯(lián)系方式,,以便工作人員及時(shí)與您聯(lián)系?。?/div>