免费人与物交的无码,人妻厨房丰满熟妇,黄色一级免费

“左右開弓”——為什么說 HILIC 也是您純化極性化合物時所需方法,？

步琦 2022-09-30 | 閱讀：1962

當(dāng)我們面對一些實(shí)驗(yàn)的時候，潛意識里總是更傾向于用自己非常熟悉的某種方式或方法并嘗試進(jìn)行稍微調(diào)整就可以讓它適用于當(dāng)前面對的所有應(yīng)用研究,。但這就像是說,，您擁有一把切菜非常好用的刀并不意味著它是鋸木的最佳方法。

親水相互作用色譜（HILIC）

今天呢,，“小布”同學(xué)在這里和您再介紹一種分離方法：親水相互作用色譜（HILIC）,。認(rèn)識它，熟悉它,，裝備它,！讓您面對不同實(shí)驗(yàn)可以做到“左右開弓”！

OK,！讓我們看看它可以為您的極性化合物的純化做些什么,！

HILIC 是分離高極性化合物的理想選擇

高極性化合物通常不能用我們熟知的典型色譜柱分離，即正相色譜（NP）或反相色譜（RP）,。在正相色譜當(dāng)中,，由于化合物本身相對極性固定相來說過于粘稠，所以會導(dǎo)致洗脫時間過長,。而高極性化合物的特點(diǎn)是在水性流動相中具有良好的溶解性,，并且與典型的 NP 所用溶劑不兼容。而即使使用 RP 體系,，高極性化合物卻幾乎不與非或弱極性的固定相進(jìn)行相互作用,，最終與溶劑前沿一起被洗脫，達(dá)不到分離的目的。

每當(dāng)遇到這種情況的時候,，就是 HILIC 的 Showtime,！它的分離往往發(fā)生在極性固定相且可使用水的反相溶劑條件下。在這種情況下,，與無水的流動相相比,，含水流動相在極性固定相的表面形成了富水層。梯度洗脫從低極性有機(jī)溶劑開始,，通過增加極性水的比例來洗脫極性化合物,。

在正相色譜中固定相具有更高的極性，在反相色譜中流動相通常由水與有機(jī)溶劑組成,，而水則是色譜常用流動相體系當(dāng)中使用的最強(qiáng)極性洗脫劑,。因此，HILIC 結(jié)合了正相色譜的固定相與反相色譜的流動相的特點(diǎn)來專門“對付”高極性化合物,。簡單總結(jié)就是：HILIC 采用反相色譜流動相體系,，而按照正相色譜順序出峰。

盡管 HILIC 的混合模式機(jī)制至今仍在研究中,，但主要的保留機(jī)制被認(rèn)為是化合物在富含有機(jī)物的流動相和后來的富含水的流動相之間分配系數(shù)的不同,。除此之外，還包括其他相互作用,，如氫鍵,、靜電相互作用和偶極-偶極相互作用都有助于 HILIC 分離：

如果您對 HILIC 色譜也感到躍躍欲試的話，我推薦您使用乙腈,，因?yàn)樗c水具有良好的互溶性以及良好的 HILIC 保留和低粘度特點(diǎn),。當(dāng)然，您也可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體情況選擇其他有機(jī)溶劑,。HILIC 中的相對溶劑強(qiáng)度如下：

丙酮 < 丙醇 < 乙腈 < 乙醇 < 二惡烷 < DMF ~甲醇 < 水

就您的色譜固定相而言,，任何極性相均可用于 HILIC 分離。例如：

固定相示例

中性	二醇,；酰胺
帶電離子	Slica,；氨基丙基相
兩性離子	氨基酸、氨基磺酸

固定相相組成

中性	極性官能團(tuán),，如：酰胺,、天冬酰胺、二醇,、交聯(lián)二醇,、氰基和環(huán)糊精
帶電離子	陰離子或陽離子官能團(tuán)
兩性離子	永久帶正電荷（銨）和帶負(fù)電荷（磺酸）的官能團(tuán)

適用應(yīng)用

中性	親水化合物和混有中性、陰離子,、陽離子的混合物
帶電離子	中性極性化合物氨丙基相的伯氨基帶正電荷；因此，它對陰離子酸性化合物表現(xiàn)出較高親和力,。 Slica 表面含有 pKa 為 3.5 的酸性表面硅烷醇基團(tuán),，這意味著 ≥3.5 pKa 的 pH 值時，這些基團(tuán)將被離子化,，從而使 Slica 固定相可以作為陽離子交換劑,，與帶正電荷的堿基相互作用并對待分析物進(jìn)行保留。
兩性離子	由于它們的親水性和弱離子交換特性,，這些固定相適用于分離中性,、酸性和堿性分析物以及極性和親水性化合物以及無機(jī)離子。

保留機(jī)制

中性	親水相互作用,；無靜電相互作用
帶電離子	來自陰離子或陽離子官能團(tuán)的強(qiáng)靜電相互作用
兩性離子	弱靜電相互作用

選擇理想 HILIC 固定相的一個好的原則是,，通常來講中性化合物的親水性低于帶電化合物，而高親水性固定相需要保留它們（例如兩性離子和酰胺固定相）,。另一方面,，由于靜電引力，帶電化合物在帶電色譜柱上的保留太強(qiáng),，因此中性和兩性離子相提供更好的結(jié)果,。

其實(shí)，不管正相色譜,、反相色譜還是 HILIC 色譜等,，都有其最適合的應(yīng)用領(lǐng)域。即便 HILIC 結(jié)合了正相色譜與反相色譜的部分特征,，也不代表其滿足所有應(yīng)用,。就如同我們?nèi)粘３燥垥r，吃面往往用筷子是最簡單高效的方式,；喝湯則是用勺子最佳,。實(shí)驗(yàn)亦如此，所以在實(shí)驗(yàn)過程中還是要根據(jù)實(shí)際情況選擇最佳純化方式,。

好啦,，今天“小布”同學(xué)關(guān)于 HILIC 色譜的分享就到這里啦，相信諸位小伙伴們也對其有了一定的了解,。希望在今后的實(shí)驗(yàn)當(dāng)中它能夠助您擺脫純化高極性化合物的麻煩,！

各位，我們下期再見,！