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外囊泡的來源廣泛,，細菌外囊泡（BEV）同樣也會影響各種細胞行為,，包括遺傳信息的傳輸,、噬菌體感染,、代謝介導(dǎo)以及細菌-細菌和細菌-宿主之間的相互作用。為了方便大家更全面的認識BEV在生物治療開發(fā)中的研究現(xiàn)狀,，我們希望通過這篇綜述來系統(tǒng)地向大家進行介紹,。

PART/01  作為基因治療的遞送載體

A. 靶向骨的BEVs-hCXCR4-SOST iRNA（BEV-CSs）治療骨質(zhì)疏松癥的示意圖。

B. siRNA@M-/PTX-CA-OMV調(diào)節(jié)巨噬細胞代謝和抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的示意圖,。

C. OMVtRNA - pre-miR-126 對抗乳腺癌的示意圖,。

D.BEV遞送的DNA質(zhì)粒作為疫苗的示意圖。

E. BEV遞送了CRISPR-Cas 9,，用于樹突狀細胞靶向基因編輯,。

PART/ 02  用于遞送治療性分子

A. OMV@PGZ 搭載在中性粒細胞的便車上進入大腦后，用于增強缺血性中風(fēng)治療效果的示意圖,。

B. BEV 遞送化療藥物阿霉素用于癌癥治療的示意圖。

C. BEV負載左氧氟沙星對抗抗生素耐藥細菌的示意圖,。

D. 加載利福平的介孔二氧化硅顆粒,，被革蘭氏陰性大腸桿菌的BEV包被，以克服革蘭氏陰性菌原本的耐藥性,。

E. BEV 遞送的過氧化氫酶緩解腫瘤缺氧并增強放療效果的示意圖,。

PART/ 03  用于遞送聯(lián)合治療的功能性制劑

A. 融合黑色素瘤細胞膜囊泡（CMV）和沙門氏菌衍生的外膜囊泡（OMV）的外囊泡封裝 PLGA - 吲哚菁綠（PI@EPV）以增強協(xié)同抗腫瘤作用的示意圖。

B. OMV 包被的聚多巴胺納米顆粒（MOD@DMV）增強抗瘤光熱免疫治療的構(gòu)建路線方案。

C. MOD@DMV形態(tài)的TEM圖像和光熱性能的表征,。

D.靶向仿生遞送平臺（ZnBq/Ce6@ZIF-8@OMV）的圖示,，大腸桿菌的 OMV在基因改造后，靶向?qū)︴U曼不動桿菌的特異性識別,，用于運輸金屬抗生素對抗多重耐藥細菌,。

E. ZnBq / Ce6@ZIF-8@OMV在體內(nèi)發(fā)揮抗菌作用，消除腦組織中的細菌并促進感染小鼠的存活,。

F. 生物礦化大腸桿菌衍生的外膜囊泡,，以減輕過度反應(yīng)的炎癥反應(yīng)和肝損傷，包裹溶瘤腺病毒以介導(dǎo)腫瘤細胞自噬,，用于系統(tǒng)免疫治療,。

PART/ 04 作為納米疫苗

01/ 抗細菌感染疫苗

A. 含有 SaoA-LPP的BEV納米疫苗可保護小鼠免受豬鏈球菌感染。 

B. 富含T3SS-3和T6SS-1（M9-OMV）的基于BEV的疫苗可保護小鼠免受毒性性類鼻疽芽孢桿菌的侵害,，且對活細胞沒有毒性,。

C. ΔompAΔompCΔompD BEV納米廣譜疫苗保護小鼠免受所有沙門氏菌菌株和APEC O78的侵害。

D. 雜交納米疫苗（Ab-NP）表現(xiàn)出高度的尺寸均勻性和更強的免疫反應(yīng),。

E. BEV與肺泡巨噬細胞膜雜交以提高生物相容性和調(diào)節(jié)免疫反應(yīng),，降低免疫過度刺激、過度炎癥或?qū)λ拗鹘M織造成損傷,。

02/ 抗病毒感染疫苗

A. 將外露SARS-CoV-2刺突蛋白的細胞膜囊泡與鼠傷寒沙門氏菌的BEV雜交,，形成病毒模擬雜交膜衍生囊泡（HMV），BEV作為佐劑來增強免疫反應(yīng),。 

B. 在BEV上改進LPS可保護小鼠免受不同血清型的流感病毒感染,。 

C. 將HIV-1包膜近端外部區(qū)域（MPER）與外膜蛋白OmpF摻入BEV納米疫苗上可誘導(dǎo)抗HIV 1-抗體的產(chǎn)生。

D. 基于BEV的疫苗誘導(dǎo)針對 8 種血清型HPV的L2特異性IgG滴度,。

E. 負載HPV E7的BEV疫苗表現(xiàn)出抗腫瘤功效,，表明該疫苗對HPV陽性或?qū)m頸癌患者具有潛在的治療價值。 

F. 表達融合HCV蛋白的BEV納米疫苗在小鼠中誘導(dǎo)IgG-1,，表明BEV具有卓越佐劑特性及其作為未來HCV疫苗開發(fā)平臺的潛力,。

03/ 抗腫瘤疫苗

A. 基于OMV的疫苗示意圖: 通過在ClyA上融合多種蛋白質(zhì)捕獲器 （Spycatcher 和 Snoopcatcher）進行多功能抗原展示，實驗表明其在 MC38腫瘤模型中具有潛在的抗腫瘤免疫力,。

B. 基于OMV的mRNA遞送系統(tǒng)方案：通過在OMV表面融合RNA結(jié)合蛋白 L7Ae和內(nèi)體逃逸促進蛋白LLO ,。

C. 基于OMV的mRNA遞送系統(tǒng)的轉(zhuǎn)移抑制效果，對體內(nèi)的抗腫瘤療效和長期免疫記憶的影響,。

D. 通過膜融合嗜粘蛋白阿克曼菌的外膜囊泡和腫瘤衍生外泌體制備 Lipo@HEV的示意圖,，輔以表達PD-L1的質(zhì)粒，用于協(xié)同癌癥免疫治療,。

E.制備和生物礦化OMV疫苗（OMV-SIRPα@CaP/GM-CSF）以增強血液中的安全循環(huán),，刺激訓(xùn)練免疫力以進行不同的腫瘤消退,。

BEV的優(yōu)勢

1.與哺乳動物細胞來源的細胞外囊泡（MEV）相比，BEV具有一些顯著的特點：

更易生產(chǎn),、產(chǎn)量更高,，且成本更低。作為細菌的衍生物,，其倍增時間短,，可以進行高密度的液體培養(yǎng)，只需依賴于廉價且容易獲得的液體培養(yǎng)基,，從而降低了成本益,。

2. 高度穩(wěn)定，并且對蛋白酶和核酸酶等多種酶活性具有抵抗力這一特性,，適合用于對溫度和酶活性敏感的生物分子貨物,，同時允許在高溫下長期儲存生物分子。而無需長時間昂貴的物流過程（如冷凍儲存）,。

3. 穿透能力更強,，能夠穿透生物組織屏障，如上皮細胞層,，靶向骨骼結(jié)構(gòu),，甚至繞過血腦屏障（BBB），同時BEVs具有MEV不具備的對親本細菌的親和力,。

貝克曼庫爾特生命科學(xué)細菌外囊泡純化方案

參考文獻：

1. Bacteria extracellular vesicle as nanopharmaceuticals for versatile biomedical potential2.Bacterial extracellular vesicles as bioactive nanocarriers for drug delivery: Advances and perspectives