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曾收到一位做工藝開(kāi)發(fā)的老師反饋,，他使用的一款細(xì)胞計(jì)數(shù)儀三次檢測(cè)同一個(gè)樣品，每次分析結(jié)果和平均值的偏差都超出正?？山邮芊秶?。

這么簡(jiǎn)單的儀器為何會(huì)出現(xiàn)這種問(wèn)題

是否是儀器本身的性能問(wèn)題

根據(jù)《定量細(xì)胞計(jì)數(shù)方法性能的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和統(tǒng)計(jì)分析（ISO20391-2:2019）》一文中,，關(guān)于細(xì)胞計(jì)數(shù)方法性能判定的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，建議至少做4個(gè)濃度梯度,，每個(gè)濃度梯度至少做3次重復(fù)性測(cè)試,。我們可以考慮使用該方法來(lái)評(píng)判手上細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的性能好壞，具體的細(xì)胞選擇和樣品制備上可以參考ISO20391-2:2019里面的具體描述,。

在此,，我們拿Vi-CELL BLU全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀和另一款半自動(dòng)插板式細(xì)胞計(jì)數(shù)儀分別進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)的重復(fù)性和準(zhǔn)確性的性能評(píng)估。

這里檢測(cè)用到的是一種腫瘤細(xì)胞,，按4個(gè)濃度梯度稀釋（原液,，2倍，5倍和10倍稀釋）,，并且每個(gè)濃度做3組重復(fù)性檢測(cè),，以下是測(cè)試得到的結(jié)果和統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)。

由于半自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀裝機(jī)后很久未做過(guò)標(biāo)樣的驗(yàn)證和校準(zhǔn),，所以和全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的測(cè)試結(jié)果之間的差異在此不做比較分析。

為了能比較得出這兩臺(tái)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的重復(fù)性和準(zhǔn)確性的性能水平,，我們將每臺(tái)儀器3次原液檢測(cè)（編號(hào)：S3-原液）得到的活細(xì)胞密度平均值作為“真值”,。那么Vi-CELL BLU得到的“真值”是3.44M，而半自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀得到的“真值”是3.06M,。而其他3個(gè)稀釋倍數(shù)下計(jì)算得到的平均結(jié)果,，都分別和這個(gè)“真值”進(jìn)行比較，并且計(jì)算得到相對(duì)偏差,。

通過(guò)分析我們可以看到隨著S3樣品的稀釋倍數(shù)不斷增加,，Vi-CELL BLU的活細(xì)胞密度平均值偏差也逐漸變大，但都在±10%的偏差范圍內(nèi),。同時(shí)每個(gè)稀釋倍數(shù)下的3次重復(fù)性檢測(cè)RSD都小于5%,，顯示出良好的測(cè)試結(jié)果重復(fù)性。

而半自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀對(duì)5倍和10倍稀釋的樣品檢測(cè),，3次測(cè)試結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差已經(jīng)大于10%,，并且稀釋10倍的活細(xì)胞密度平均值和原液“真值”結(jié)果比較,，偏差達(dá)到了15.03%。所以,，半自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的重復(fù)性檢測(cè)上相對(duì)要差很多,，并且隨著稀釋倍數(shù)增加，檢測(cè)得到的結(jié)果和原液結(jié)果之間的偏差加大,。

通過(guò)以上這種性能檢測(cè)方法,，我們可以得出無(wú)論是在3次測(cè)試的重復(fù)性，還是梯度稀釋結(jié)果的準(zhǔn)確性,，Vi-CELL BLU全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀都比半自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀更有優(yōu)勢(shì),。如果您對(duì)自己使用的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀性能感興趣，也可以嘗試用這個(gè)方法來(lái)檢測(cè)判斷,。