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基因編輯技術(shù)是指能夠?qū)δ繕嘶蜻M行定點“編輯”,,例如片段插入,、缺失,,堿基定點編輯等,,實現(xiàn)對特定DNA片段的修飾,。
基因編輯工具
目前的基因編輯工具主要有鋅指核酸酶(ZFN),、轉(zhuǎn)錄因子激活樣效應(yīng)物核酸酶(TALEN)和規(guī)律間隔成簇短回文重復(fù)序列(CRISPR/Cas)等技術(shù),。CRISPR/Cas系統(tǒng)由于其精準,、簡單、快速,、成本低的特點,,成為目前基因編輯使用最為廣泛的技術(shù)。
以CRISPR系統(tǒng)為例,,在使用CRISPR/Cas系統(tǒng)進行基因編輯過程中,,需要gRNA來引導(dǎo)Cas蛋白對基因組進行切割,然后再通過供體兩端的同源片段進行同源重組,,或利用生物體自身的非同源末端連接進行修復(fù),。
CRISPR/CAS基因編輯技術(shù)
基因編輯流程
無論使用哪種工具進行基因編輯,都需要構(gòu)建載體,,將基因編輯工具導(dǎo)入到細胞中,,然后對細胞進行驗證,篩選出被正確編輯的細胞,。
以酵母細胞基因編輯為例:
構(gòu)建載體過程包含了基因合成或擴增,、基因組裝、質(zhì)粒轉(zhuǎn)化,、大腸桿菌培養(yǎng),、質(zhì)粒驗證、測序等步驟,。然后將構(gòu)建好的載體轉(zhuǎn)入酵母細胞中,,其中包含酵母轉(zhuǎn)化、培養(yǎng),、克隆驗證等步驟,。
基因編輯流程長,、步驟多、需要熟練的操作,,耗費了科研工作者大量的時間和精力,,往往是抬頭看文獻、低頭做實驗,,實驗虐我千百遍,,我待實驗如初戀。
如果可以將基因編輯使用的質(zhì)粒像工業(yè)化生產(chǎn)線上的產(chǎn)品一樣自動化生產(chǎn),,輸入不同的基因片段,,產(chǎn)出相應(yīng)的質(zhì)粒,然后再將其轉(zhuǎn)入宿主細胞中進行基因編輯,,將極大的提高科研以及研發(fā)效率,,并且可以使科研人員從實驗中解放出來,專注于實驗的設(shè)計和數(shù)據(jù)分析,。
自動化基因編輯
基因編輯自動化流水線需要完成基因擴增,、組裝、大腸桿菌轉(zhuǎn)化,、克隆驗證,、質(zhì)粒提取、質(zhì)粒轉(zhuǎn)染,、宿主驗證等多種實驗操作,,其中涉及多種儀器設(shè)備,,如自動化液體工作站,、酶標儀、克隆挑選機器人,、培養(yǎng)箱,、PCR儀、離心機,、封膜機,、撕膜機等。同時,,需要一款強大的整合軟件,,進行儀器調(diào)度、資源分配,、耗材統(tǒng)籌,、數(shù)據(jù)管理,使實驗過程更加的流暢,。
Beckman Coulter自1986年生產(chǎn)第一臺Biomek 1000自動化液體工作站開始,,至今已有30余年時間,,期間不斷開發(fā)、創(chuàng)新,,提升產(chǎn)品力,,并擁有專業(yè)的整合部門,為客戶提供個性化的整合方案,。
Beckman產(chǎn)品發(fā)布時間軸
Beckman Coulter可以為您的基因編輯過程提供定制化服務(wù),,設(shè)計滿足您需求的解決方案。
基因編輯自動化系統(tǒng)示例
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