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細胞異質(zhì)性存在于生命醫(yī)學(xué)研究的各個領(lǐng)域,,包括腫瘤學(xué),,干細胞分化發(fā)育,免疫學(xué)等,。重大生命醫(yī)學(xué)問題的解決,,必須首先解決細胞異質(zhì)性的問題。
通過單細胞檢測技術(shù),,對異質(zhì)性細胞進行分類,,是細胞異質(zhì)性分析的主要手段。單細胞測序技術(shù)實在基因?qū)用娴膯渭毎治?,但是所有生物學(xué)效應(yīng),,包括生理學(xué)效應(yīng),病理學(xué)效應(yīng),,藥物反應(yīng)等,,*后都是通過特定蛋白質(zhì)來發(fā)生和調(diào)控的。
Milo單細胞蛋白質(zhì)表達定量分析系統(tǒng),,技術(shù)來源自美國**大學(xué)加州大學(xué)伯克利分校Amy E. Herr教授實驗室,,該實驗2014年原創(chuàng)性技術(shù)發(fā)表在Nature Method,題目Single cell western blot,。ProteinSimple借助強大的軟件及硬件研發(fā)實力,,將其開發(fā)為單細胞蛋白質(zhì)表達定量檢測系統(tǒng),,用于細胞異質(zhì)性及稀缺細胞樣本(比如循環(huán)腫瘤細胞等)研究。
檢測流程
Milo單細胞蛋白質(zhì)定量表達分析系統(tǒng),,是**款單細胞水平,,蛋白質(zhì)表達定量分析系統(tǒng)。Milo系統(tǒng)采用**的微流控western blot芯片,,通過單細胞微孔設(shè)計,,采集單細胞,然后原位裂解細胞,,釋放蛋白,,進行蛋白質(zhì)電泳,將不同分子量蛋白進行分離,,提高免疫學(xué)檢測特異性,。之后,采用**技術(shù)進行蛋白質(zhì)原位捕獲,,使用western blot驗證抗體及熒光標記二抗直接雜交,,掃描儀進行芯片掃描后,Scout軟件對掃描結(jié)果進行深度定量分析,。
因為Milo對單細胞蛋白質(zhì)表達分析的獨特優(yōu)勢,,在7月份上市之后,連續(xù)獲得了MIT technology review 年度創(chuàng)新獎,,美國**雜志 The Scientist 年度創(chuàng)新產(chǎn)品**名,。
Milo具有極其強大的功能:
1. 單張芯片可進行1000-2000個單細胞western blot檢測
2. 單個細胞可進行數(shù)十個靶蛋白檢測
3. 僅需使用western blot驗證抗體
4. 基于western blot技術(shù),蛋白質(zhì)分離后檢測,,提高免疫學(xué)檢測特異性
5. 全程檢測4-6小時
6. 適用于:細胞異質(zhì)性研究及稀缺樣本檢測,。
參考文獻:
1.Microfluidic Western blotting,,PNAS,,December 26, 2012,, vol. 109 ,,no. 52,21450–21455
2. Single-Cell Western Blotting after Whole-Cell Imaging to Assess Cancer Chemotherapeutic
Response,, Anal. Chem. 2014,, 86, 10429?10436
3. Single-cell western blotting,,Nature methods,,11, 749–755 (2014) doi:10.1038/nmeth.2992 4. Hydrogel Pore-Size Modulation for Enhanced Single-Cell Western Blotting,,Adv. Mater. 2016,, 28,
327 –334
5. Single cell–resolution western blotting,1508 | VOL.11 NO.8 | 2016 | Nature protocols
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