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細(xì)胞異質(zhì)性存在于生命醫(yī)學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域,,包括腫瘤學(xué),干細(xì)胞分化發(fā)育,,免疫學(xué)等,。重大生命醫(yī)學(xué)問(wèn)題的解決,必須首先解決細(xì)胞異質(zhì)性的問(wèn)題,。
通過(guò)單細(xì)胞檢測(cè)技術(shù),,對(duì)異質(zhì)性細(xì)胞進(jìn)行分類(lèi),是細(xì)胞異質(zhì)性分析的主要手段,。單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)實(shí)在基因?qū)用娴膯渭?xì)胞分析,,但是所有生物學(xué)效應(yīng),包括生理學(xué)效應(yīng),,病理學(xué)效應(yīng),,藥物反應(yīng)等,*后都是通過(guò)特定蛋白質(zhì)來(lái)發(fā)生和調(diào)控的,。
Milo單細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)定量分析系統(tǒng),,技術(shù)來(lái)源自美國(guó)**大學(xué)加州大學(xué)伯克利分校Amy E. Herr教授實(shí)驗(yàn)室,,該實(shí)驗(yàn)2014年原創(chuàng)性技術(shù)發(fā)表在Nature Method,題目Single cell western blot,。ProteinSimple借助強(qiáng)大的軟件及硬件研發(fā)實(shí)力,將其開(kāi)發(fā)為單細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)定量檢測(cè)系統(tǒng),,用于細(xì)胞異質(zhì)性及稀缺細(xì)胞樣本(比如循環(huán)腫瘤細(xì)胞等)研究,。
檢測(cè)流程
Milo單細(xì)胞蛋白質(zhì)定量表達(dá)分析系統(tǒng),是**款單細(xì)胞水平,,蛋白質(zhì)表達(dá)定量分析系統(tǒng),。Milo系統(tǒng)采用**的微流控western blot芯片,通過(guò)單細(xì)胞微孔設(shè)計(jì),,采集單細(xì)胞,,然后原位裂解細(xì)胞,釋放蛋白,,進(jìn)行蛋白質(zhì)電泳,,將不同分子量蛋白進(jìn)行分離,提高免疫學(xué)檢測(cè)特異性,。之后,,采用**技術(shù)進(jìn)行蛋白質(zhì)原位捕獲,使用western blot驗(yàn)證抗體及熒光標(biāo)記二抗直接雜交,,掃描儀進(jìn)行芯片掃描后,,Scout軟件對(duì)掃描結(jié)果進(jìn)行深度定量分析。
因?yàn)镸ilo對(duì)單細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)分析的獨(dú)特優(yōu)勢(shì),,在7月份上市之后,,連續(xù)獲得了MIT technology review 年度創(chuàng)新獎(jiǎng),美國(guó)**雜志 The Scientist 年度創(chuàng)新產(chǎn)品**名,。
Milo具有極其強(qiáng)大的功能:
1. 單張芯片可進(jìn)行1000-2000個(gè)單細(xì)胞western blot檢測(cè)
2. 單個(gè)細(xì)胞可進(jìn)行數(shù)十個(gè)靶蛋白檢測(cè)
3. 僅需使用western blot驗(yàn)證抗體
4. 基于western blot技術(shù),,蛋白質(zhì)分離后檢測(cè),提高免疫學(xué)檢測(cè)特異性
5. 全程檢測(cè)4-6小時(shí)
6. 適用于:細(xì)胞異質(zhì)性研究及稀缺樣本檢測(cè),。
參考文獻(xiàn):
1.Microfluidic Western blotting,,PNAS,December 26,, 2012,, vol. 109 ,no. 52,,21450–21455
2. Single-Cell Western Blotting after Whole-Cell Imaging to Assess Cancer Chemotherapeutic
Response,, Anal. Chem. 2014, 86,, 10429?10436
3. Single-cell western blotting,,Nature methods,,11, 749–755 (2014) doi:10.1038/nmeth.2992 4. Hydrogel Pore-Size Modulation for Enhanced Single-Cell Western Blotting,,Adv. Mater. 2016,, 28,
327 –334
5. Single cell–resolution western blotting,,1508 | VOL.11 NO.8 | 2016 | Nature protocols
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