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【性能特點】

傳統(tǒng)蛋白分析的實驗技術主要是蛋白印跡,，由于操作步驟多,，操作繁瑣，每一步的失誤都會造成全盤失敗,，從而重復實驗,，對于珍貴樣品，更是要倍加小心,。另外,，試驗流程長，結果重復性差,，要達到好的實驗結果,，成本也會很高。同時,，傳統(tǒng)的蛋白印跡實驗技術無法實現準確定量,，充其量是半定量,。

Wes系統(tǒng)采用革新的Simple Western技術，顛覆30多年傳統(tǒng)的Western Blot方法,，實現在同一根樣品管中完成樣品分離,、捕獲、固定,，免疫檢測和定量分析,。

1、不用制膠和跑膠,，不用轉膜,，減少實驗步驟，避免樣品損失,。

2,、自動進行一抗二抗孵育和化學發(fā)光檢測，自動進行結果分析,，有效提高檢測結果的精確性和重復性,。

3、單個樣品上樣體積3-5ul,，節(jié)約珍貴樣品和抗體,。

4、一次運行時間3個小時,，快速高效,。

5、檢測靈敏度高,，低至pg級,。

6、實驗完成后自動給出詳盡的分析數據,，包括目的蛋白大小,、信噪比、峰面積和含量,。

7,、可對結果自動進行精確的定量分析。

Simple Western系統(tǒng)作為一個劃時代的蛋白質分析新技術,，自從2011年底推出以來,，獲得了廣泛好評和認可,，Nature Methods率先報道該技術,。目前全球重要的研究機構大多已經擁有該技術平臺，如約翰霍普金斯大學,、哈佛大學,、斯坦福大學,、耶魯大學、加州大學戴維斯分校,、加州大學**亞哥分校,、華盛頓大學、Massachusetts General Hospital ,、Mayo Clinic,、Southwest Hospital、美國CDC,、FDA,。其中NIH有5臺、National Cancer Institute有4臺,，Columbia University有4臺,、美國默克制藥有12臺、阿斯利康有7臺,、德國Charite University有4臺,。

【蛋白定量檢測】

Add your samples and primary antibody or labeling reagent to the pre-filled assay plate. Pop in Wes' capillary cartridge and load the plate. Push start and in just 3 hours get quantitated size-based separation data on up to 25 samples. After the run， toss the used cartridge and plate and you're done.

Figure 1. Total Protein detection (left) and Immune detection (right) of decreasing concentrations of DNAK in Hela

lysate and negative controls (15,， 7.5 and 3.75 μg/mL in the total protein assay; 0.015,， 0.0075 and 0.00375 μg/mL in the

immunoassay).

Figure 2. GST-labeled AKT was used to generate a standard curve for quantitation of endogenous AKT. AKT-GST was spiked into the Jurkat lysate at decreasing concentrations (250–0 pg/μL) and both the labeled and endogenous proteins were detected using an AKT1 monoclonal antibody. Linear regression

analysis was performed and the endogenous concentration of AKT in the samples was calculated as 21 pg/μL.

【技術指標】

1、功能與應用：可自動進行各種蛋白質樣品分離,、免疫檢測,、定性和定量分析，廣泛應用于蛋白質性質鑒定,、蛋白質定量分析,、蛋白質功能研究、蛋白質修飾和差異表達研究,、抗體研究等多個領域,；

2、全自動：蛋白樣品上樣后無需任何人工操作,，自動完成Western Blot分析

3,、總運行時間：≤3個小時

4、樣品總蛋白量：≤5ug

5,、樣品上樣體積：≤5ul

6,、加樣：機械手自動完成25個樣品的加樣

7、分離方式：根據分子量大小分離,，自動識別蛋白大小并完成分離

8,、分離過程：30秒采集一次數據，實時監(jiān)測分離過程

9,、制膠：無需制膠過程,，減少操作程序,，避免污染

10、固定時間：200秒,，蛋白分離后自動固定到樣品管壁上

11,、轉膜：無需轉膜步驟，不用擔心轉膜效率,，避免樣品損失,，提高蛋白質定量結果的準確率和重復性

12、抗體孵育：自動完成一抗二抗孵育和清洗

13,、檢測方法：化學發(fā)光法

14,、樣品數量：≥25個

15、樣品管規(guī)格：長125px,，內徑100um,，總體積400nl

16、進樣體積：40nL

17,、靈敏度：pg級

18,、動態(tài)范圍：3 logs

19、結果具有高度重復性：CV≤10%

20,、結果分析：實驗結束后,，無需人工分析，軟件會自動給出蛋白分子量大小,、信噪比,、百分比和峰面積

21、結果呈現形式：化學發(fā)光成像結果,，峰型圖結果和泳道式結果

22,、定量分析：運行結束后自動給出標準曲線，可**定量分析

23,、軟件升級：免費升級,，可安裝在任意電腦上，沒有拷貝數限制

24,、軟件設置：客戶可定義樣品名稱,，設置檢測流程，軟件控制整個系統(tǒng)全自動運行,，自動完成蛋白質樣品上樣,、分離、固定,、一抗孵育,、二抗孵育，免疫化學發(fā)光檢測和定量分析

目前，ProteinSimple公司提供四種Simple Western儀器,。如何選擇，請看下表,。

關于PS公司

美國ProteinSimple公司 （簡稱 PS公司）是一家致力于定義未來蛋白質分析的生命科學公司,，它結合了Alpha Innotech、Cell Biosciences,、Protein Forest,、Brightwell Technologies和Convergent Bioscience等行業(yè)**品牌，為生命科學,、醫(yī)學,、制藥和生物公司提供簡單、精確和高效的技術平臺,。

總部位于加州美國硅谷,，在美國加州、加拿大多倫多,、加拿大渥太華等地設有生產和研發(fā)部門,，同時在全球多地設有辦事處。PS公司重視中國市場的發(fā)展,，在北京,、上海，廣州和武漢設有辦事處和技術服務中心,，為用戶提供完善的技術支持和售后服務,。