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在細胞生物學(xué)功能研究中，有許多常規(guī)的研究手段,，如流式,，生物質(zhì)譜，雙向電泳,，蛋白芯片等技術(shù),。隨著研究的深入，科學(xué)家們特別需求進行真正意義上的高靈敏,，高精度研究手段,，力求通過一次實驗，快速發(fā)現(xiàn)更多的信息：鑒定結(jié)果更為可信,，靈敏度更加提高來鑒定更多低豐度蛋白,，更多的修飾信息，結(jié)構(gòu)信息等。傳統(tǒng)分析技術(shù)具有很多局限性,，如雙向凝膠電泳(2DE),，對疏水性蛋白、堿性蛋白,、特別是低豐度蛋白等無能為力,，成為蛋白質(zhì)組研究的瓶頸; 而質(zhì)譜分析技術(shù)也是由于靈敏度等問題，需要大量的樣品等原因,，十幾年來一直對研究低豐度調(diào)控蛋白缺乏信心,。

傳統(tǒng)蛋白分析技術(shù)所用的蛋白量需來自成千上萬個細胞。所得結(jié)果分辨率及重復(fù)性不理想,。各種蛋白分析法所需樣品量如下：質(zhì)譜儀樣品量 100000 個細胞細胞儀 樣品量：10000 個細胞蛋白電泳,，樣品量：5000 個細胞蛋白芯片 樣品量：1000個細胞

ProteinSimple公司的NanoPro 1000超微量蛋白分析系統(tǒng)為蛋白功能和信號通路研究提供了一個全新的研究方案。傳統(tǒng)的蛋白研究方法需要成千上萬的細胞,，而NanoPro 1000系統(tǒng)每次分析僅需要25個細胞,。并可對超微量珍貴樣品的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白之特性直接檢測，適用各種樣品包括：原代細胞FACS 分選細胞穿刺抽取之腫瘤細胞顯微切片組織細胞分離的干細胞群

NanoPro系統(tǒng)利用**的毛細管樣品定位及分析技術(shù),，結(jié)合毛細管分離及化學(xué)發(fā)光檢測原理進行納米級的自動化實驗,，避免了人為操作誤差，有效提高檢測結(jié)果的精確性和重復(fù)性,。過去蛋白檢測儀無法檢測到的信息,，如細胞內(nèi)控制通路的調(diào)控信息，可由此精確測得,。

NanoPro技術(shù)被用來分析信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中所涉及的蛋白構(gòu)象上的極細微變化,。

NanoPro1000從新的角度分析蛋白調(diào)控機制，NanoPro技術(shù)采用等電點電泳的方法將不同構(gòu)象的蛋白分離,。該方法大大推進了多個領(lǐng)域的研究,，包括： ·藥物開發(fā)-篩選激酶抑制劑藥物的作用靶點·生物標(biāo)記物的發(fā)現(xiàn)和確認(rèn)-觀察疾病引起的蛋白構(gòu)象的細微變化，研究其發(fā)病機制

·腫瘤蛋白活性-研究組織和細胞中腫瘤蛋白的調(diào)控機制翻譯后修飾的研究-檢測蛋白構(gòu)象改變引起的等電點極細微的變化

NanoPro 1000將蛋白分離與檢測技術(shù)相結(jié)合:NanoPro將毛細管等電點電泳和化學(xué)發(fā)光免疫測定這兩種常用的蛋白檢測技術(shù)相結(jié)合,。等電點電泳可將不同構(gòu)象的蛋白分離,。分離后蛋白被儀器固定在毛細管壁上，接著用化學(xué)發(fā)光免疫的方法檢測蛋白,。這為信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白的檢測提供了新的視角,。

【操作流程】

上樣

每個毛細管中加400nl樣本混合物，包括樣本,、熒光標(biāo)記PI和兩性電解質(zhì),。

分離

毛細管兩端加電壓，樣本中的蛋白質(zhì)隨著自身等電點的不同,，加以分離,。

固定

毛細管在紫外光照射下，其毛細管壁上的**化學(xué)物質(zhì)被激活，從而將分離的蛋白異構(gòu)體固定在毛細管壁上,。

免疫標(biāo)記

用洗脫液將非特異結(jié)合的蛋白質(zhì)洗脫,，將固定的蛋白質(zhì)進行免疫反應(yīng)，加入發(fā)光催化劑誘導(dǎo)其化學(xué)發(fā)光,，發(fā)光信號被CCD攝像機拍攝下來,。

結(jié)果分析

通過專業(yè)的軟件，對結(jié)果進行定量分析

關(guān)于PS公司

美國ProteinSimple公司 （簡稱 PS公司）是一家致力于定義未來蛋白質(zhì)分析的生命科學(xué)公司,，它結(jié)合了Alpha Innotech,、Cell Biosciences、Protein Forest,、Brightwell Technologies和Convergent Bioscience等行業(yè)**品牌,，為生命科學(xué)、醫(yī)學(xué),、制藥和生物公司提供簡單,、精確和高效的技術(shù)平臺。

總部位于加州美國硅谷,，在美國加州,、加拿大多倫多、加拿大渥太華等地設(shè)有生產(chǎn)和研發(fā)部門,，同時在全球多地設(shè)有辦事處,。PS公司重視中國市場的發(fā)展，在北京,、上海,，廣州和武漢設(shè)有辦事處和技術(shù)服務(wù)中心,，為用戶提供完善的技術(shù)支持和售后服務(wù),。