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BTX ECM 399電穿孔儀
適用于動植物,、細(xì)菌、酵母,、哺乳動物,、人類細(xì)胞(包括活體細(xì)胞)的轉(zhuǎn)基因等操作,,操作方法可參照相關(guān)文獻(xiàn),及向廠商索要,。ECM399轉(zhuǎn)基因儀主要用于哺乳動物轉(zhuǎn)染,、細(xì)菌酶轉(zhuǎn)化,,具有脈沖長,、磁場強(qiáng)為其特點。
BTX ECM 399電穿孔儀應(yīng)用舉例
高壓型用于:DNA或誘變等大腸桿菌結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)基因
低壓型用于轉(zhuǎn)染,、淋巴,、髓膠質(zhì)成纖維和COS-7細(xì)胞
無論任何一種哺乳動物細(xì)胞均可選擇不同的電壓和脈沖范圍,并且脈沖可隨時調(diào)整
細(xì)菌/酵母轉(zhuǎn)化(系統(tǒng):ECM399/630)
電穿孔現(xiàn)在被認(rèn)作是轉(zhuǎn)化細(xì)菌及酵母的***的方法,。革蘭氏陰性細(xì)菌(例如大腸桿菌)一般比革蘭氏陽性細(xì)菌更容易轉(zhuǎn)化,,因為他們的細(xì)胞壁組成不同,。對于革蘭氏陰性細(xì)菌常??梢垣@得10的10次方轉(zhuǎn)化2/微克DNA的轉(zhuǎn)化效率,,而對于革蘭氏陽性細(xì)菌,一般可以得到10的6次方轉(zhuǎn)化2/微克DNA,。Chang等人(1997)成功對一個mtz-敏感的Heliobacterpylori菌株進(jìn)行電穿孔以傳遞mtz抵抗性,。Planelles等人(1999)使用電穿孔轉(zhuǎn)化大腸桿菌,,以避免使用包裝物質(zhì)。*近電穿孔儀器方面的進(jìn)展將使研究人員能夠進(jìn)一步優(yōu)化細(xì)菌轉(zhuǎn)化(例如脈沖長度產(chǎn)生方面擴(kuò)展的功能條件),。
RNA,、DNA,、蛋白質(zhì)以及小分子都已經(jīng)通過電穿孔的方法轉(zhuǎn)入酵母。沒有必要在電穿孔前部分去除酵母細(xì)胞壁,,因為在完整酵母電穿孔方面的進(jìn)展可以產(chǎn)生高的轉(zhuǎn)化率,。Faber等人(1994)年優(yōu)化了S.Cerevisiae的實驗方案,使用HansenulaPolymorpha獲得了比以前的報告增加300倍的轉(zhuǎn)化效率,。
在質(zhì)粒修復(fù)中,,質(zhì)粒從酵母轉(zhuǎn)入大腸桿菌以進(jìn)行詳細(xì)的DNA序列分析,這是另外一種重要的技術(shù),。這種兩個步驟的過程被電穿孔進(jìn)行了簡化,,用于驗證隱性基因的結(jié)構(gòu),將其導(dǎo)入酵母,,看基因性和表現(xiàn)性之間的關(guān)系,。已經(jīng)建立了標(biāo)準(zhǔn)的實驗方案使用指數(shù)衰減波發(fā)生器例如BTXECM630轉(zhuǎn)化細(xì)菌/酵母。使用方形波電穿孔儀的實驗方案,,例如BTXECM830,,來轉(zhuǎn)化細(xì)菌/酵母。研究人員還成功將大的質(zhì)粒(BAC及YAC)導(dǎo)入細(xì)菌,。電穿孔杯是細(xì)胞及酵母電穿孔的*常用附件,,而Model747共軸電極使用則變得越來越普遍。
BTX ECM 399電穿孔儀技術(shù)參數(shù)
高壓模式 | 電壓 | 10-2500V,,10V調(diào)進(jìn) |
電阻 | 150Ω | |
電容 | 36μF | |
低壓模式 | 電壓 | 2-500V,,2V調(diào)進(jìn) |
電阻 | 151Ω | |
電容 | 1050μF |
暫無數(shù)據(jù)!