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Biolistic PDS-1000/He 基因槍系統(tǒng)將微米大小的、包被有核酸的金或鴿微粒(0.6-1.6 μm )加速到所需要的速度,,從而將基因?qū)爰?xì)胞,、組織或器官。系統(tǒng)利用高壓氨氣的轟擊,,來推動攜帶有微粒的塑料大顆粒載體盤朝目標(biāo)細(xì)胞方向加速,。推進(jìn)大顆粒載體的氨氣壓力由所使用的不同破裂盤決定。破裂盤是一種可在特定壓力下破裂的塑料密封體,。終止屏可阻止大顆粒載體,,但微粒可以通過從而進(jìn)入靶細(xì)胞,。為了提高這一進(jìn)程的效率,,可抽空轉(zhuǎn)化室,使壓力低于大氣壓力,,從而當(dāng)微粒進(jìn)入靶細(xì)胞時可減少其摩擦阻力,。
1、一種可重復(fù)的,、轉(zhuǎn)化完整培養(yǎng)細(xì)胞的方法,,幾乎無需對細(xì)胞進(jìn)行處理
2、可以避免使用傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染方法時化學(xué)試劑對靶細(xì)胞的毒性作用
3,、實驗過程的**控制
4,、高重復(fù)性
PDS-1000/He 基因槍系統(tǒng)加上Hepta 適配器后,可以比標(biāo)準(zhǔn)系統(tǒng)多轉(zhuǎn)化7-10 倍的細(xì)胞,。它配接PDS-1 000/He 系統(tǒng)的沖擊室,,將氯氣沖擊波分導(dǎo)至7 個載體盤處。這樣,,通過在更大面積上均一地分散DNA 包被的金粉或鴿粉,,增加了這個系統(tǒng)一次轟擊的細(xì)胞數(shù),。當(dāng)氨氣被分成7 道時,降低了壓力和顆粒速度,,該系統(tǒng)特別適合不太需要強(qiáng)大穿透力的植物和培養(yǎng)細(xì)胞,。
轟擊參數(shù)* | ||||
細(xì)胞類型 | 真空("Hg) | 目標(biāo)間距(cm) | 氯氣壓力(psi) | 金屬微粒大小 |
細(xì)菌 | 29 | 6 | 1,100 | M-5 鴿粉 |
酵母菌 | 28 | 6 | 1,,300 | 0.6 μm 金粉 |
藻類 | 29 | 6 | 1,,300 | 0.6 μm 金粉 |
植物 胚芽 | 28 | 6 | 1,300 | 1.0 μm 金粉 |
愈傷組織 | 28 | 9 | 1,,100 | 1.0 μm 金粉 |
細(xì)胞器 | 28 | 6 | 1,,300 | 0.6 μm 金粉 |
動物 | ||||
組織培養(yǎng) | 15 | 3 | 1,100 | 1.6 μm 金粉 |
組織切片 | 25 | 9 | 1,,100 | 1.6 μm 金粉 |
暫無數(shù)據(jù),!