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原理
液相色譜是一類分離與分析技術(shù),,其特點是以液體作為流動相,固定相可以有多種形式,,如紙,、薄板和填充床等。在色譜技術(shù)發(fā)展的過程中.為了區(qū)分各種方法,,根據(jù)固定相的形式產(chǎn)生了各自的命名,,如紙色譜、薄層色譜和柱液相色譜,。
經(jīng)典液相色譜的流動相是依靠重力緩慢地流過色譜柱,,因此固定相的粒度不可能太小(100μm~150μm左右)。分離后的樣品是被分級收集后再進(jìn)行分析的,,使得經(jīng)典液相色譜不僅分離效率低,、分析速度慢,而且操作也比較復(fù)雜,。直到20世紀(jì)60年代.發(fā)展出粒度小于10μm的高效固定相,,并使用了高壓輸液泵和自動記錄的檢測器,克服了經(jīng)典液相色譜的缺點,,發(fā)展成高效液相色譜,,也稱為高壓液相色譜。
應(yīng)用
高效液相色譜應(yīng)用非常廣泛,,幾乎遍及定量定性分析的各個領(lǐng)域,。
(1)分離混合物
高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動相可選擇的范圍寬,,固定相的種類繁多,,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì),。
通過與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合,,高效液相色譜法所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度,可分離并同時測定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì),,能夠分離復(fù)雜混合物中的微量成分,。并且隨著固定相的發(fā)展,還可在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成對其的分離,。
(2)生化分析
由于高效液相色譜法具有高分辨率,、高靈敏度、速度快,、色譜柱可反復(fù)利用,,流出組分易收集等優(yōu)點,因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué),、食品分析,、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析,、無機(jī)分析等各種領(lǐng)域,,并已成為解決生化分析問題*有前途的方法。
(3)儀器聯(lián)用
高效液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個重要的發(fā)展方向,。高效液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)受到普遍重視,,如分析氨基甲酸酯農(nóng)藥和多核芳烴等:高效液相色譜一紅外光譜聯(lián)用也發(fā)展很快,如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類等.使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展
暫無數(shù)據(jù),!