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原理
液相色譜是一類分離與分析技術,，其特點是以液體作為流動相，固定相可以有多種形式,，如紙,、薄板和填充床等,。在色譜技術發(fā)展的過程中．為了區(qū)分各種方法，根據(jù)固定相的形式產生了各自的命名,，如紙色譜,、薄層色譜和柱液相色譜。
經(jīng)典液相色譜的流動相是依靠重力緩慢地流過色譜柱,，因此固定相的粒度不可能太小(100μm～150μm左右),。分離后的樣品是被分級收集后再進行分析的，使得經(jīng)典液相色譜不僅分離效率低,、分析速度慢,，而且操作也比較復雜。直到20世紀60年代．發(fā)展出粒度小于10μm的高效固定相,，并使用了高壓輸液泵和自動記錄的檢測器,，克服了經(jīng)典液相色譜的缺點，發(fā)展成高效液相色譜,，也稱為高壓液相色譜,。
應用
高效液相色譜應用非常廣泛，幾乎遍及定量定性分析的各個領域,。
(1)分離混合物
高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,，不受樣品揮發(fā)性的限制，流動相可選擇的范圍寬,，固定相的種類繁多,，因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質,。
通過與試樣預處理技術相配合,，高效液相色譜法所達到的高分辨率和高靈敏度，可分離并同時測定性質上十分相近的物質,，能夠分離復雜混合物中的微量成分,。并且隨著固定相的發(fā)展，還可在充分保持生化物質活性的條件下完成對其的分離,。
(2)生化分析
由于高效液相色譜法具有高分辨率,、高靈敏度、速度快,、色譜柱可反復利用,，流出組分易收集等優(yōu)點，因而被廣泛應用到生物化學,、食品分析,、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無機分析等各種領域,，并已成為解決生化分析問題*有前途的方法,。
(3)儀器聯(lián)用
高效液相色譜儀與結構儀器的聯(lián)用是一個重要的發(fā)展方向。高效液相色譜一質譜聯(lián)用技術受到普遍重視,，如分析氨基甲酸酯農藥和多核芳烴等：高效液相色譜一紅外光譜聯(lián)用也發(fā)展很快,，如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類等．使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展
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